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亲和色谱PPT

亲 和 色 谱 Affinity Chromatography ? 黄岳 生研1502 亲和色谱概述 概念:利用生物分子间专一的亲和力而进行分离的一种色谱技术 原理和基本过程 原理:将具有亲和力的两个分子中一个固定在不溶性基质上,利用分子间亲和力的特异性和可逆性,对另一个分子进行分离纯化。 亲和色谱的类型 免疫亲和色谱 固定化金属离子亲和色谱 其他亲和色谱 免疫亲和色谱 免疫亲和色谱(Immunoaffinity Chromatography, IAC)是利用生物体内存在的抗原、抗体之间高度特异性的亲和力进行分离的方法。 IAC的特点 专一 高效 灵敏 …… IAC的应用 抗体的分离纯化——Protein A亲和色谱 快速诊断测试 …… 固定化金属离子亲和色谱 固定化金属离子亲和色谱(Immobilized Metal ion Affinity Chromatography, IMAC) 主要根据蛋白质中组氨酸、色氨酸或半胱氨酸等氨基酸残基与色谱柱上的金属离子螯合作用形成络合物,从而实现分离蛋白质的目的。 IMAC的特点 配基稳定性高 ,不易脱落 金属离子配基价格低廉 ,再生成本低 省去了脱盐的预处理步骤 容易洗脱目标蛋白 IMAC的应用——Ni-Agarose His标签蛋白纯化技术 其他亲和色谱技术 生物亲和色谱 拟生物亲和色谱 分子对亲和色谱 共价亲和色谱 凝集素亲和色谱 ……

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