急性髓细胞白血病中p27kip1的表达及临床意义.docVIP

急性髓细胞白血病中p27kip1的表达及临床意义 作者：王明永 王凡平 宋志善,景本年 【摘要】 　　目的 探讨急性髓细胞白血病中p27kip1的表达及其临床意义。方法 采用免疫组化SP法检测37例急性髓细胞白血病及10例正常对照者骨髓中p27kip1蛋白的表达情况，并结合临床病历资料进行分析。结果 p27kip1蛋白在急性髓细胞白血病的阳性表达率为29.7％，正常对照组表达率为70.0％，二者比较差异有显著性（P0.05）；在34例接受化疗的急性髓细胞白血病中，p27kip1阳性表达组化疗后的缓解率（81.8％）高于p27kip1 表达阴性组的缓解率（43.5％），差异有显著性（P0.05）。结论 p27kip1在急性髓细胞白血病患者中存在异常表达，且其蛋白的表达水平可能会影响化疗疗效。 【关键词】 p27kip1 急性髓细胞白血病 细胞周期 　　急性髓细胞白血病是由于髓系细胞恶性增殖引起的一种恶性疾病，在各类白血病中急性髓细胞白血病发病率最高，在我国发病率为1.62/十万。目前研究认为细胞周期失控是该病的发生原因之一。细胞周期的调控受到一系列调控因子的影响,这些调控因子根据其作用的不同分为正性调控因子和负性调控因子。其中正性调控因子包括细胞周期素（cyclin）和细胞周期素依赖性激酶（cyclindependent kinase,CDK），负性调控因子由细胞周期素依赖型激酶抑制物(CDKInhibitor,CDKI)组成。作为负性调控因子之一的p27kip1属于CDKI中CIP/KIP家族中的成员，近来被认为是候选的抑癌基因。本文通过免疫组化SP法检测p27kip1蛋白在37例急性髓细胞白血病中的表达情况，并结合临床资料探讨其与急性髓细胞白血病的关系及其对化疗疗效的影响。 　 　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 2004年3月～2006年2月为贵阳医学院附属 医院 确诊为急性髓细胞白血病（leukemia）患者37例（包括初发和复发），其中男性23例，女性14例，男女为1.61，年龄17～78岁，中位年龄47岁，其中M2 18例、M3 4例 、M4 6例、M5 7例、M7 2例。10例健康体检者作为对照。 　　1.2 试剂 抗p27kip1单抗(即用型)、SP免疫组化试剂盒、DAB显色剂、苏木素、PBS缓冲液、APES液（均购自福州迈新公司）、丙酮、无水乙醇。 　　1.3 实验方法 抽取骨髓液0.2～0.3 mL，直接涂于防脱胶处理的玻片上， 自然 干燥后，冷丙酮固定10 min，－20 保存被检。操作严格按照试剂盒说明进行，阳性对照片由迈新公司提供。 　　1.4 结果判定标准 阳性细胞标准：阳性细胞主要表现为细胞核中出现棕黄色颗粒，同时有部分胞质着色的细胞，PBS代替一抗作空白对照，用已知阳性对照片作阳性对照；计数方法：在高倍镜视野下计数100个单个核细胞，按显色细胞占观察细胞的百分率，当阳性细胞数大于10%者判定为阳性，小于10％者判定为阴性。 　　1.5 统计学处理 用Spss12.0统计软件包，计数资料采用χ2检验,P0.05为差异有显著性。 　　 2 结果 　　2.1 p27kip1的表达 在37例急性髓细胞白血病患者中，有11例出现阳性表达，阳性率为29.7%;对照组中p27kip1的阳性表达率为70.0%，p27kip1在急性髓细胞白血病中阳性表达率明显低于正常对照组,差异有显著性（P0.05）,见表1。 　　2.2 临床分析 在37例急性髓细胞白血病患者中，3例确诊后放弃 治疗 。在34例接受化疗的急性髓细胞白血病中，M2、M4、M5、M7用TA方案(吡柔比星20 mg/m2/d,第1～3天；阿糖胞苷150 mg/m2/d,第1～7天)，2个疗程未达到完全缓解者使用HA方案（高三尖杉酯碱3 mg/m2/d,第1～5天；阿糖胞苷150 mg/m2/d,第1～7天），M3采用口服维甲酸。接受化疗的患者中有19例完全缓解，其中11例p27kip1阳性表达患者中有9例缓解，化疗缓解率达到81.8％，明显高于p27kip1表达阴性组的化疗缓解率（43.5％），差异有显著性（P0.05）,见表2。 　　表1 p27kip1在两组中的表达情况（略） 　　Table 1 The expression of p27kip1 in acute myeloid leukemia and in control groups 　　与对照组比较: *P＜0.05 　　表2 p27kip1在急性髓细胞白血病中的表达与化疗缓解情况的关系（略） 　　Table 2 The relationship between the expression of p27kip1 in acute myeloid leuke