白花败酱草提取物对小鼠U14宫颈癌细胞的抑制作用.docVIP

白花败酱草提取物对小鼠U14宫颈癌细胞的抑制作用 作者：陈磊 张涛 田黎明 陈萍 王东伟 卢春凤 闫冬梅 【摘要】 目的 研究白花败酱草水提液对小鼠移植性宫颈癌的抑制作用及其机制。方法 观察败酱草大、小两个剂量水提液对U14荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制率及胸腺和脾腺指数的影响;采用比色分析法检测血清中总抗氧化能力(TAOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)的变化;采用HE染色，光镜下观察败酱草诱导肿瘤组织细胞分化的程度。结果 高、低剂量败酱草水提液均可抑制U14宫颈癌细胞的生长，抑瘤率分别为42.3%、41.75%;同时荷瘤鼠胸腺和脾腺指数明显降低(P0.01);败酱草水提液可降低U14荷瘤鼠血清MDA水平(P0.01)，提高TAOC和SOD活性(P0.01)。HE染色后，败酱草水提液能在一定程度上改善肿瘤组织形态。结论 白花败酱草水提液具有抗U14宫颈癌的作用。其机制可能与调节小鼠免疫功能，增强抗氧化防御系统酶活性有关。 【关键词】 白花败酱草;U14荷瘤鼠;抗肿瘤 白花败酱草是败酱科草本植物的带根全草，是一种常用植物药〔1～3〕。民间验方中与其他中药配伍，用于 治疗 肠癌和膀胱癌。但有关白花败酱草水提液在抗肿瘤方面的作用及其机制，国内外尚未见报道。 　 　1 材料与方法 　　1.1 动物与试剂 6周龄昆明种小鼠，体重20～22 g， 中国 医学 科学 院实验动物研究所繁育场提供，室温(20±2)环境中颗粒食料喂养，自由饮水。环磷酰胺(CTX)购于山西泰盛制药有限公司， U14小鼠宫颈癌细胞株购于中国医学科学院细胞库。白花败酱草购于佳木斯中 医院 中药局，经鉴定符合药典标准。 　　1.2 方法 　　1.2.1 白花败酱草水提液的制备 取败酱草100 g适当粉碎后，10倍体积蒸馏水浸泡3 h，煮沸提取60 min，收集药液，药渣再用水煮30 min，合并2次药液，经50减压浓缩，真空干燥箱放置，得败酱草水粗提物固体干粉。4冰箱保存，临用前蒸馏水稀释为含生药浓度3.5 g/ml。 　　1.2.2 模型建立 50只小鼠随机分为分别是瘤源鼠组、白花败酱草水提液低剂量组(10 g/kg)、高剂量组(15 g/kg)、CTX组及对照组每组10只。瘤源组鼠腹腔注射U14细胞株，每只鼠0.2 ml,制造腹水型瘤源鼠，此鼠腹腔注射7 d后在无菌条件下吸取腹腔中的腹水型瘤细胞，稀释成1.6×106个/ml，常规无菌条件下给其余4组小鼠每只左前腋下接种0.2 ml瘤细胞。在接种瘤细胞24 h后，开始按10 mg/kg和15 mg/kg给鼠灌服白花败酱草水提液，对照组每天灌服同剂量的蒸馏水;CTX组按25 mg/kg腹腔注射CTX;连续14 d，第15天小鼠断髓处死，称量体重和瘤重。 　　1.2.3 检测指标 (1)肿瘤抑制率=(C-T)/C×100%，C和T表示对照组和治疗组的平均瘤重。(2)胸腺指数=10×胸腺重量(mg)/体重(g)×100%，脾脏指数=10×脾脏重量(mg)/体重(g)×100%。(3)血清总抗氧化能力(TAOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量的测定：小鼠摘眼球取血，离心分离血清备用，各指标采用比色法按试剂盒说明进行检测。(4)肿瘤细胞形态学的观察：对照组、水提液组(15 g/kg)及CTX组的瘤体被固定在10%甲醛中做石蜡包埋切片，HE染色，光镜下观察细胞形态。 　　1.3 统计学处理 数据采用x±s表示，组间差异采用t检验。 　 　2 结 果 　　2.1 白花败酱草水提液对U14荷瘤鼠的抑瘤作用 见表1。高、低剂量败酱草水提液和CTX均能降低瘤体的重量。各实验组瘤体平均重量明显低于对照组(P0.01)，肿瘤组织生长的抑制率分别为41.75%、42.30%和44.21%。 　　2.2 白花败酱草水提液对U14荷瘤鼠胸腺、脾腺重量的影响 水提液高剂量组、CTX与对照组比较胸腺和脾腺的重量明显降低(P0.01)。见表2。 　　2.3 白花败酱草水提液对U14荷瘤鼠血清TAOC、SOD、MDA含量的影响 败酱草水提液和CTX均可降低U14荷瘤鼠血清MDA水平，同时提高TAOC和SOD活性(均P0.01)。见表3。表1 白花败酱草水提液对U14荷瘤鼠的肿瘤抑制率与对照组比较：1)P0.01;下表同 　　2.4 白花败酱草水提液对肿瘤细胞形态学的影响 各组实体瘤切片HE染色后，光镜下观察细胞形态，灌服水提液(15 g/kg)、CTX与对照组比较，肿瘤细胞数明显减少，部分区域可见正常细胞排列,呈巢状分布,出现核深染、异形和固缩的细胞减少，细胞异形性趋向中等分化。见图1。表2 白花败酱草水提液对U14荷瘤鼠胸腺和脾腺指数的影响(mg/10 g，x±s) 　　 3 讨 论 　　败酱