2009研究生分子医学技能实验五.pptVIP

* /department/biochemistry * 中山医学院 /department/biochemistry 分子医学实用技术 蔡卫斌 生 物 化 学 教 研 室 ?4 ? caiwb@ 生物化学与分子生物学教研室 生化与分子生物学技术 中山医学院 生物化学与分子生物学教研室 实验八：不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳 一、 不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳 实验操作及注意事项 实验分组（每人做一管，每组配一份胶） ?认清试剂（试剂和吸管对号、量器的使用） ? 封管 ? 分离胶配制与灌胶（浓度为6%，化学聚合，每组总体积为10ml，灌胶高度为7~8cm） 封正丁醇3mm（手法、高度、观察界面变化和判断凝固、时间掌握15min） P147： 注意事项： 1、封管要严，防止漏液。 2、固定玻璃管要竖直，防止夹碎。 3、每组配一份胶，试剂与移液管对号，准确加量。 4、配胶后立即灌胶（用滴管灌胶，用后立即清洗） 5、正丁醇沿管壁缓缓加入 浓缩胶配制（浓度为3%，光聚合，每组总体积为8ml，灌胶高度为1.5cm,留1cm空隙加样） ? 倒掉正丁醇 灌浓缩胶 ? 封正丁醇3mm（观察界面，判断凝固时间） ? 安装电泳槽（结构、原理、电流及电极的方向、不漏水、除气泡） 注意事项： 1、倒掉正丁醇，用滤纸吸干再灌浓缩胶。 2