HRM应用实验设计及结果分析.pptVIP

第七步：检查二级结构 第八步：将引物序列与该物种基因组序列相BLAST，以确定其特异性 三、反应体系 Component Concentration Diluent (Mol. Biol. Grade water) - PCR Buffer 1X MgCl2 1.5 mM dNTPs 0.2 mM Forward primer 300 nM Reverse primer 300 nM SYTO?9 1.5 μM EvaGreen 1-2X Taq DNA polymerase 1.25 U DNA Template 3 x 109 copies/μL 所需的试剂与耗材 试剂 耗材 热启动Taq Platinum? Taq DNA polymerase (Invitrogen) Hotstart Taq (Qiagen) 10X PCR 缓冲液 随Taq酶 50 mM MgCl2 随Taq酶 100 mM dNTP溶液 Invitrogene, NEB等 饱和内掺染料 SYTO 9 (Invitrogen) EvaGreen (Biotium) LC Green (Idaho Technology) Eco plates Eco Adhesive Seals 试剂的处理与保存条件 Reagent Storage Temp. Storage State Taq DNA polymera