真核基因表达调控2010-3.pptVIP

第二节 真核生物基因表达的调控 真核生物调控的特征： 真核生物基因表达的调控核心途径： 环境信号转导 染色质活化 转录的激活 基因表达以正调控为主 转录与翻译在不同的亚细胞区域进行 2 基因重排 通过基因的转座或DNA的断裂错接等形式使正常基因序列发生改变，使一个基因从远离启动子的地方移到距它较近的位点从而启动转录 （二）反式作用因子（转录因子，transcription factor） 能直接或间接地识别或结合在各顺式作用元件序列上，参与调控靶基因转录效率的结合蛋白称作反式作用因子(trans－acting factor) 1. DNA序列相结合的反式作用因子 a. CAAT盒激活因子 CTF（CAAT box transcription factor）家族是能识别CAAT盒的一组转录因子。这一组因子是由单个基因通过可变换的剪接而形成的一组mRNA产生的。CTF家族成员对各种CAAT盒有相同的亲和力。 CP为另一组CAAT区结合蛋白，它们是从人的HeLa细胞中得到的。CP1具有对α-球蛋白和腺病毒晚期基因启动子CAAT区的高亲和力，CP2具有对γ-血纤蛋白原基因启动子CAAT区的高亲和力，而CP3能与腺病毒DNA相结合。CP族蛋白主要以异源多聚体的形式存在。 除了CTF和CP族蛋白能与CAAT区结合外，科学家还从小鼠肝细胞里发现两个CAAT区结合蛋白。CBP对序列GCAAT有较强的亲和力，而ACF则对卵清蛋白基因启动子区的CCAAT有高亲和力。? C. GC区结合因子 ? GC区结合蛋白SP1是1.0x105的单体，能与DNA链上包括GGGCGG在内约20bp的序列特异结合。在SV40启动子区，从-70～-110的6个GC区全部与SP1结合，所以这个区域的DNA不会被降解。在胸腺嘧啶激酶启动子区，SP1既与上游的CTF（CAAT区结合蛋白）相互作用，又与下游的TFIID紧密相关。? ? GC区对SP1的结合是必需的，但该序列对于SP1亲和力却很不相同，证明GC区两翼序列同样在SP1的识别及结合过程中发挥作用。人们推测GC区、尤其是多次重复的GC区，与基因的永久型表达有关。 d. 八碱基对元件激活蛋白 ? 八碱基对元件也能被多个激活蛋白识别。Oct-1是非淋巴样细胞中结合八碱基对元件的转录激活因子，没有组织特异性。 Oct-2则是组织特异的激活因子。 ? 反式因子有两个必需的结构域 DNA 结合结构域：与顺式元件识别、结合 转录激活结构域：与RNA聚合酶结合 2 反式作用因子DNA结合结构域模式 Helix-turn-helix α螺旋-β转角-α螺旋 是最早发现于原核生物中的一个关键因子（CAP），该结构域长约20个aa，主要是两个α-螺旋区和将其隔开的β转角。其中的一个被称为识别螺旋区，因为它常常带有数个直接与DNA序列相识别的氨基酸 Zinc-fingers 锌指 最常见DNA结合域之一 约有30个AA残基 其中4个AA残基 （2个Cys，2个His或4个Cys） 配位键 Zn2+ 锌指 与DNA双螺旋大沟结合。 存在于多种真核转录因子 具多个锌指结构 Leucine-zippers 亮氨酸拉链 一段肽链中每隔7个AA 即有一个Leu α螺旋 亲水面：亲水AA组成 疏水面：Leu组成 （亮氨酸拉链条） 可形成二聚体（发挥作用） （同二聚体/异二聚体） DNA的结合域： 拉链区以外结构 helix-loop-helix 螺旋-环-螺旋 ?　 长约50个aa残基，同时具有DNA结合和形成蛋白质二聚体的功能，其主要特点是可形成两个亲脂性α-螺旋，两个螺旋之间由环状结构相连，其DNA结合功能是由一个较短的富碱性氨基酸区所决定的 转录激活结构域（transcription activation domains）一般由20-100个氨基酸残基组成。如GAL4分子中有2个这种结构域，分别位于多肽链的第147-196位和第768-881位；GCN4的转录激活结构域位于多肽链的第106-125位。 A 酸性α-螺旋(acidic α-helix) 该结构域含有由酸性氨基酸残基组成的保守序列，多呈带负电荷的亲脂性α-螺旋，包含这种结构域的转录因子有GAL4、GCN4、糖皮质激素受体和AP-1/Jun等。增加激活区的负电荷数能提高激活转录的水平。可能是通过非特异性的相互作用与