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第三节 真核生物基因的转录
(三)真核生物RNA 聚合酶(RNA Pol II) 与模板结合;与转录起始、延伸有关 与DNA、底物和新生的RNA结合 负责酶的装配 附:真核基因在转录时RNA聚合酶需要多种 转录因子的协助 (四)转录因子 1、通用因子(General factor) (1)是所有启动子起始RNA合成所必须 (2)与RNA 聚合酶在起始位点周围形成复合体, 并决定起始的位置。 TBP(TATA binding protein)----定位因子 a、在TATA框处与DNA结合 b、是所有三种RNA聚合酶转录起始所需的因子 TBP与DNA作用的机制: a 、两个结构域形成一个完全二元对称的马鞍型 结构 2、上游因子(Upstream factor) (1)识别并与启动子上游元件结合 (2)与上游元件结合可增加转录起始的效率 (五)启动子 RNA 聚合酶Ⅰ的启动子:位于转录起点上游 RNA 聚合酶Ⅱ的启动子:位于转录起点上游RNA 聚合酶III的启动子:位于转录起点下游 二、RNA 聚合酶 I 基因的转录 (一)rRNA基因(Ribosomal RNA Genes ) 多拷贝基因 1、核心启动子(core promoter)或核心元件: 位于-45 ~ +20,负责转录的起始。 2、上游控制元件(upstream control element ): 位于-180 ~ -107,可增加转录起始的效率。 (三)RNA Pol I的辅助因子(UBF1 SL1) 1、上游结合因子(UBF1) (1)可以与UCE结合 (2)可与核心元件的一段序列结合 (3)两个UBF1通过蛋白-蛋白相互作用而相互结合,导致在两个结合位点间的DNA形成一个环状结构。 2、选择因子1(SL1) (1)组成:4个亚基 a、TBP (TATA-binding protein): 是保证RNA pol 准确结合到起始位点的一个关键因子 b、其他的三个亚基TAF:(TBP 相关因子) 为RNApol I转录所需的亚基称为TAFI (2)功能:是使RNA 聚合酶正确的定位在起始位点。 三、RNA 聚合酶III 基因的转录 (一)tRNA基因的转录 1、启动子----基因内启动子 (1)启动子的两个保守序列: A框(5’-TGGCNNAGTGG-3’); B框 (5’-GGTTCGANNCC-3’) (2)A框和B框编码的序列: A框----D-loop; B框---- TψC-loop 2、tRNA基因转录因子 (1)TFⅢC:识别boxB (2)TFⅢB:与A框上游50bp上游序列结合 a、组成: TBP、BRF、B” b、功能:是RNA聚合酶Ⅲ真正的起始因子 (二)5S rRNA 基因的转录 1、5S rRNA 基因: 特点:串连排列,形成基因簇 (是唯一单独被转录的rRNA亚基) 2、启动子: C框 ;A框 3、转录因子: (1) TFIIIA :结合位点为C box 。 (2) TFIIIC (3) TFIIIB: TBP + BRF + B// 四、RNA 聚合酶 II 基因的转录 (一)RNA聚合酶 II 的启动子 1、组成: 核心启动子(core promoter): TATA盒(Hogness box): - 25 ~ -35bp 上游启动子(upstream promoter element,UPE) CAAT盒 :-70 ~ -80区 GC盒:-80 ~ -110区 2、核心启动子(core promoter): (1)TATA盒(Hogness box): a、位置: - 25 ~ -35bp b、序列特征:富含AT, 5’-TATA(A/T)A(A/T)-3’. c、功能:决定RNApol II的定位与转录精确起始 (2)起始子(initiator,Inr) 与转录起始位点重叠的短的较保守序列 3、上游启动子(upstream promoter element,UPE) (1)位置: CAAT盒 :-70 ~ -80区( -70区) GC盒:-80 ~ -110区(-90区) (2)功能: 控制转录起始的频率
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