RNA转录－遗传信息从DNA到RNA.pptVIP

转录的基本概念 RNA种类 新生RNA中出现发卡式结构会导致RNA聚合酶的暂停，破坏RNA-DNA杂合链5’端的正常结构。寡聚U的存在使杂合链的3’端部分出现不稳定的rU?dA区域，两者共同作用使RNA从三元复合物中解离出来。 终止效率与二重对称序列和寡聚U的长短有关，随着发卡式结构（至少6bp）和寡聚U序列（至少4个U）长度的增加，终止效率逐步提高。 启动子区结构特点 Pribnow将RNA聚合酶全酶与模板DNA结合后，用DNaseI降解DNA，得到41～44个核苷酸对的DNA片段。 序列分析发现，在被保护区内有一个由5个核苷酸组成的保守序列，是聚合酶结合位点，称为Pribnow区，其中央大约位于起点上游10bp处，所以又称为–10区。 科学家又从噬菌体的左、右启动子PL及PR和SV40启动子的–35 bp附近找到了另一段共同序列：TTGACA，称为–35区 现已证实大部分启动子都存在这两段共同序列，即位于–10 bp处的TATA区和–35 bp处的TTGACA区，它们是RNA聚合酶与启动子的结合位点。 TATA区的主要作用是使转录精确地起始。如果除去TATA区或进行碱基突变，转录产物下降的相对值不如CAAT区或GC区突变后明显，但发现所获得的RNA产物起始点不固定 CAAT区和GC区主要控制转录起始频率，基本不参与起始位点的确定。 核内不均一RNA（hnRNA, heterogeneous nuclear RNA）:由DNA转录生成的原始转录产物，即mRNA的前体。它必须经过一定程度的加工才能正常起作用，经过加工使初级转录产物变为成熟的转录物的过程称RNA转录后加工。 （1）减少部分片段：如内含子的剪接； （2）增加部分片段：5′加帽，3′加poly(A),通过编辑加入一些碱基； （3）对某些碱基进行甲基化等修饰。 在原核生物中： rRNA基因和tRNA基因混合组成一个操纵子： 16SrDNA tDNA 23SrDNA 5SrDNA tDNA rRNA转录初始物: 16SrRNA tRNA 23SrRNA 5SrRNA tRNA 加工 RNA酶Ⅲ对转录初始物切割 再加工成熟 (二) tRNA的加工 tRNA的加工分成3个阶段 (1) “斩头”： 形成5′末端； (2) “去尾”： 形成3′-OH末端。缺CCA的tRNA要用tRNA核酸转移酶加-CCA。 (3)修饰：通过甲基化酶，硫醇酶，假尿嘧啶核苷化酶等进行修饰，如氨基酸臂的4-硫尿苷（4tu），D臂的2甲基鸟苷（2mG），TψC臂的假尿苷（ψ）和反密码子环上的2异戊腺苷（2ipA) 二 真核生物tRNA和rRNA的加工 　　　　　　（一）　tRNA的加工： (1)真核生物的tRNA是单顺反子，但成簇排列，基因间有间隔区； (2)真核生物tRNA基因一般都比原核tRNA基因多得多，如酵母约有400个tRNA基因； (3) 5′端单磷酸核苷酸，表明已被加工过； (4) tRNA的前体分子中含有内含子　 tRNA的加工 碱基修饰 3’端 5’端 切除反密码环 的内含子 转位 --- Tψ 脱氨 --- AMP IMP 还原 --- DHU 甲基化--- mA mG CCA-OH RNaseP切除多余的核苷酸 RNaseP 在前tRNA二级结构基础上 真核细胞中rRNA的加工途径 (1) 切除5′端的前导序列； (2)甲基化 (3)从41S的中间产物中先切下18S的片段。 (4) 最后形成28S,18S,5.8SRNA 5’端加帽 3’端加尾 RNA的剪接 RNA的编辑 5’端的一个核苷酸总是7-甲基鸟核苷三磷酸（m7Gppp）。mRNA5’端的这种结构称为帽子（cap）。 帽子结构功能： ①能被核糖体小亚基识别，促使mRNA和核糖体的结合； ②m7Gppp结构能有效地封闭mRNA 5’末端，以保护mRNA免受5’核酸外切酶的降解，增强mRNA的稳定。 2、3’端加polyA尾 转录产生的核内mRNA前体分子与蛋白质结合，形成RNA和蛋白质组成的RNP复合物（ribonucleo-protein particle）。随着RNA链的延伸，每个内含子5’和3’两端的复合物成对联结，产生60S的颗粒—剪接体（spliceosome），进行RNA前体分子的剪接。 4、RNA的编辑 编辑（editing）是指转录后的RNA在编码区发生碱基的突变、加入或丢失等现象。经过编辑的mRNA序列发生了不同于模板DNA的变化。 2.尿苷酸的缺失和添加 RNA编辑的另一种形式是尿苷酸的缺失和添加。研究发现，利什曼原虫属细胞色素b m