信号转导异常与细胞增生和凋亡.pptVIP

* TPA:佛波酯 * Philip Leder：哈拂大学，1984，转基因—受精卵—雌鼠 小鼠乳腺瘤病毒（MTV）的 启动子连接起来成为一个MT州m yc融合基 因。用微量注射法注人小鼠受精卵雄前核，再 植人假孕雌鼠的输卵管，令其发育和娩出小鼠， 这样他们建立了13个拥有 MT州m yc融合基 因的转基因小鼠系，MTV的启动子是受激素 调控的（催乳素、糖皮质激素）。有两头最初接 受 MTV/myc融合基因的雌鼠在第三次妊娠时 都发生了乳腺腺癌。 * 1960年美国费城慢性粒细胞性白血病患者中发现. * NIH3T3小鼠纤维母细胞 * Wee1，myt1：PK 抑制CDK TCR：T细胞受体 基因易位—Burkitt淋巴细胞瘤 在CML中的bcr-abl融合基因 基因易位— 费城染色体 4. 基因扩增 ①均质染色区（Homogeneously staining regions, HSR） 正常染色区带外的均匀染色区 ②双微体（Double minutes, DM） 点状假染色体 5．基因偶联 某些原癌基因在特定条件下，因其它原癌基因的首先激活而序贯活化。 使细胞永生的癌基因，产物位于细胞核（C-myc） 互补 使细胞增殖的癌基因，产物位于细胞质（C-ras） 偶联 6．基因抑制消除 DNA上控制基因表达的特殊片段 C-myc基因第1外显子不编码，可能有抑制作用，丢失造成激活 DNA分子的甲基化增加双螺旋稳定性 （三）癌基因功能 细胞永生化(immortalization) 阻断细胞分化，挽救细胞凋亡，通常定位于胞核。 细胞转化(transformation) 是细胞减少对生长因子的依赖而持续增生，通常位于胞膜或胞浆。 细胞外信号 EGF、PDGF等 GRB2 SOS Raf 调节其他蛋白活性 MAPKK MAPK P P P 细胞核 fos、jun、myc 调控基因表达(cyclinD) 细胞膜 P P Ras- GTP （MAPKKK） （MEK） （ERK） PI3K PIP3 Akt 抗凋亡、促增殖 PTEN - 二、生长相关的主要信号转导途径 90%恶性肿瘤存在突变 卵巢癌 头颈部癌、乳腺癌 三、抑癌基因(tumor suppressor gene) 定义 是一大类可以抑制细胞生长并有潜在抑制细胞恶性转化的基因。 1. 抑癌基因多为隐性基因，故不易被发现。 2. 理论上讲，细胞内有多少癌基因就有多少 抑癌基因相匹配。 3. 抑癌基因在细胞内所处的位置可能与癌基 因相似。 抑癌基因的发现： 1. 细胞遗传学分析 70年代，Kundson—视网膜母细胞瘤易感基因 （Retinoblastoma，Rb）缺失—存在肿瘤抑制基因 2. 细胞杂交实验 70年代，Harris—杂交瘤实验—证明存在抑癌基因 认知过程：癌蛋白－癌基因－抑癌基因 细胞杂交试验 正常细胞 肿瘤细胞 非肿瘤型杂交细胞 杂交融合 肿瘤细胞1 肿瘤细胞2 杂交融合 非肿瘤型杂交细胞 正常细胞 失去某些基因 肿瘤细胞 p53--多种肿瘤易感基因 P53 —迄今为止与人类肿瘤相关性最高的基因 突变方式 p53基因完全丢失 p53基因突变: 一对p53等位基因失活 一个p53失活，获得显性癌基因特 征使另一野生p53失去抑癌作用。 1. 基因定位：17p13.1 2. 基因结构：11个外显子，第1个不编码。 3. 蛋白结构：53kDa ( 7个结构域，Th：20min ) p53 酸性区 核心区 碱性区 N’- -C’ 易被蛋白酶水解；一些磷酸化位点，与蛋白稳定性有关。 DNA结合区，重要功能部位。 四寡聚体区；多个修饰（磷酸化）位点，与调节DNA结合活性相关。 p53 pathway 激活方式 稳定性 转录活性 Cdk1 P53引起Growth arrest的作用机制 P53蛋白 解链酶 复制因子A P21蛋白 细胞停滞于G1期 细胞自杀 DNA损伤 P21基因 P53蛋白 抑 制 P53蛋白 成功修复 修复失败 视网膜母细胞瘤易感基因 （Retinoblastoma，Rb） 1. 基因定位：13q14 2. 基因结构：27个外显子。 3. 蛋白结构：105kDa（P105RB） 4. 蛋白功能：DNA结合蛋白，在G0，G1期与E2F结合， 抑制E2F的转录活性，抑制多种原癌基因表 达，控制细胞周期信息系统。 5. 活性调节：磷酸化