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现代生物科技专题专题一 基因工程 2、基本工具 限制性核酸内切酶（限制酶） 磷酸二酯键 DNA连接酶与DNA聚合酶的比较 作用：将外源基因送入受体细胞 条件： 种类：质粒、噬菌体和动植物病毒 最常用的载体－－质粒 二、基本步骤： 第一步：目的基因的获取 第二步：基因表达载体的构建 第三步：将目的基因导入受体细胞 第四步：目的基因的检测与鉴定 将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的DNA→表达 目的基因的检测与鉴定 ⑴分子水平检测： ①检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因： 方法——DNA分子杂交(探针与基因组DNA) ②检测目的基因是否转录出了mRNA： 方法——分子杂交（探针与生物体mRNA） ③检测目的基因是否翻译成蛋白质： 方法——抗原—抗体杂交(生物中蛋白质与抗体) （3）基因工程的应用 （3）基因工程的应用 §2:克隆技术 §2:克隆技术 §2:植物组织培养 §2:植物组织培养理论基础 §2:植物组织培养的过程 §2:植物组织培养的过程 §2:植物组织培养中的核心概念 §2:植物组织培养中的核心概念 §2:植物组织培养中的核心概念 §2:动物克隆的技术基础 动物的克隆繁殖 §2:动物克隆的技术基础 §2:动物克隆 动物细胞培养 动物细胞培养 原代培养和传代培养 动物细胞培养 §3:胚胎工程 §3:胚胎工程 §3:胚胎工程 §3:胚胎工程 §3:胚胎工程 5．受精卵可直接动物胚胎移植吗？ §3:胚胎工程 §3:胚胎工程 §3:胚胎工程 §4:生物技术的安全性和伦理问题 §4:生物技术的安全性和伦理问题 §5:生态工程 §5:生态工程 §5:生态工程 2．下列有关胚胎工程的叙述，正确的是 A．胚胎干细胞培养时，为了抑制其分化，常需接种在胚胎成纤维细胞上 B．从附睾取出的成熟精子可直接与成熟的卵细胞受精 C．胚胎分割的对象应选择受精卵 D．胚胎移植最适宜的时期是原肠胚时期 第四章 采用显微手术（机械方法）的方法将早期胚胎分割成2分胚,4分胚或8分胚,经体内或体外培养后植入受体，以得到同卵双胎或同卵多胎的技术。 胚胎分割的时期为：囊胚或桑椹胚。 51页：用于饲养层的细胞一般是胚胎成纤维细胞 a.外源基因插入宿主基因组的部分往往是随机的，可能破坏正常基因的结构。 如：(2008江苏卷)如果将外源基因导入小鼠受精卵，则外源基因可能随机插入到小鼠受精卵DNA中。这种受精卵有的可发育成转基因小鼠，有的却死亡。请分析因外源基因插入导致受精卵死亡的最可能原因是 。 b.基因间存在相互作用的关系，外源基因引入后，是否会影响其他重要的调节基因，甚至会激活原癌基因？ c.转基因生物可能威胁生态系统中其他生物的生存，使生态系统的稳定性发生改变。 d.转基因技术广泛应用是可能产生“超级生物”，导致难以消灭的新病原体出现、产生生物入侵等造成生态学灾难。 e.人类摄食大量转基因食品可能对有些人产生转基因食品过敏。 1．对转基因生物安全性的担忧 ①基因克隆（分子水平） ②细胞克隆（细胞水平） ③个体克隆（植物克隆和动物克隆） 一、克隆概念的发展（三个水平） 二、克隆技术的发展 1、微生物克隆（细胞克隆） 2、遗传工程克隆（DNA克隆） 3、个体水平克隆 理论基础 植物组织培养 核心概念 植物细胞的全能性 细胞具有发育成完整植株的潜能。 这种潜能－－植物细胞的全能性。 植物体的每个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因。 不同种类、不同个体的植物细胞全能性相同吗？ 离体的植物器官或组织或细胞（外植体） 愈伤组织 细胞分裂和脱分化 胚状体或不定芽 植物幼体 继续发育 （单细胞） 分散 一棵完整的植株 细胞分裂和再分化 需要适宜的环境条件 离体的植物器官或组织或细胞（外植体） 愈伤组织 细胞分裂和脱分化 胚状体或不定芽 植物幼体 继续发育 （单细胞） 分散 一棵完整的植株 细胞分裂和再分化 光照问题: 形成愈伤组织不需要光照而愈伤组织的再分化需要光照 愈伤组织细胞中有叶绿体吗？ 适当调整植物激素的比例 生长素与细胞分裂素的浓度及其比例不同调控脱分化和根与芽的再分化 是将离体的植物器官(根、茎、叶、花、果实、种子等)、组织(形成层、花药组织、胚乳、皮层等)、细胞(体细胞、生殖细胞等)、胚(成熟和未成熟的胚)、胚乳、原生质体，在无菌条件下培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱发产生愈伤组织、胚状体或不定芽等，再长成完整的植株，统称为植物组织培养。 根据外植体来源和培养对象的不同，又分为器官培养、组织培养、胚培养、原生质体培养等。 植物组织培养: 愈伤组织： 胡