生物化学-第34章-DNA的生物合成.pptVIP

DNA复制过程 DNA复制过程 DNA复制过程 复制起始复合物 13bp序列富含AT易变性成为开链复合物（Open Complex），DnaC协助DnaB结合在解链区（Unwoundregion）,解开的单链迅速被SSB结合。此时，形成了起始复合物（Initial Complex） DNA复制的调节发生在起始阶段，一旦开始复制，如无意外受阻，就能一直进行到完成。 复制起始物形成后，将DNA双链分开，分开之处形成复制叉结构。 1、复制的起始 E.coli的复制起始点称为ori C，由245个bp组成，其序列和控制元件十分保守，一般含2个反向重复（4个9bp）和3个（13bp）串联重复单位。（P421图） 2个反向重复序列为Dna A蛋白结合位点，20~40个Dna A蛋白各带一个ATP结合在此位点上，与DNA缠绕，形成起始复合物。 然后，在HU蛋白，Dna B蛋白（解螺旋酶）（沿模板链5′→3′移动）、拓扑异构酶Ⅱ、SSB等作用下，双螺旋解开，复制起始。 2、复制的延伸 E.coli DNA的复制起始后，由Dna G（引物合成酶）在起始位点合成一段10-60个核苷酸的RNA引物，然后在DNA聚合酶Ⅲ作用下，进行DNA聚合反应。 3、复制的终止 终止子（ E.coli有6个，ter A——ter F）。与终止子结合的蛋白为Tus。Tus-ter复合物能够阻止一个方向的复制叉前移，即不让对侧复制叉超过终点后过量复制。 DNA复制终止 真核生物有多种DNA聚合酶真核生物有多种DNA聚合酶。从哺乳动物细胞中分出5种DNA聚合酶，分别以a、β、γ、δ、ε来命名。真核生物DNA聚合酶和细菌DNA聚合酶的基本性质相同，均以4种脱氧核糖核苷三磷酸为底物，需Mg激活，聚合时必须有模板和引物 3－OH存在，链的延伸方向为 5’一3’。 端粒酶是一种含有RNA链的逆转录酶，它以所含RNA为模板来合成DNA端粒结构。通常端粒酶含有约150个碱基的RNA链，其中含二个半拷贝的端粒重复单位的模板。复制使端粒5’末端缩短，而端粒酶（telomerase）可外加重复单位到5末端上，结果维持端粒一定长度。 二、DNA的损伤修复 （一）错配修复 （二）直接修复 （三）切除修复 （四）重组修复 （五）应急反应（SOS）和易错修复 （一）错配修复 错配修复（mismatch repire）。DNA在复制过程中发生错配，如果新合成链被校正，基因编码信息可得到恢复；但是如果模板链被校正，突变就被固定。细胞错配修复系统能够区分“旧”链和“新”链。Dam甲基化酶可使旧链DNA的GATC序列中腺嘌呤N6位甲基化。复制后DNA在短期内（数分钟）为半甲基化的GATC序列，一旦发现错配碱基，即将未甲基化的链切除，并以用基化的链为模板进行修复合成。 （二）直接修复 紫外线照射可以使DNA分子中同一条链两相邻胸腺嘧啶碱基之间形成二聚体（TT）。这种二聚体是由两个胸腺嘧啶碱基以共价键联结成环丁烷的结构而形成的。影响了DNA的双螺旋结构，使其复制和转录功能均受到阻碍。光复活作用是一种高度专一的直接修复方式。它只作用于紫外线引起的DNA TT二聚体。光复活酶在生物界分布很广，从低等单细胞生物一直到鸟类都有，这种修复方式在植物中特别重要。而高等的哺乳类却没有。有其他修复机制所代替。 解聚合 切除修复机理 有四步：1、识别、特异性内切酶切开；2、以另一链为模板合成3、切去损伤链；4、连接酶连接缺口。 在重组修复过程中， DNA链的损伤部位可能被切除，也可能未被切除。当进行第二论复制时，如果损伤还留在母链上，仍会给复制带来困难，复制经过损伤部位时所产生的缺口还需通过同样的重组过程来弥补，直至损伤被切除修复所消除。但是，随着复制的不断进行，若干代后，即使损伤始终未从亲代链中除去，而在后代细胞群中也已被稀释，实际上消除了损伤的影响。 三、DNA的突变 （一）突变的类型 （二）诱变剂的作用 （三）诱变剂和致癌剂的检测 （三）诱变剂和致癌剂的检测 提要 第34章 DNA的复制与修复 信息流动 不含DAN的生物，RNA也可自我复制。有些病毒以自己的RNA为模板指导DNA的生物合成称为逆转录。 一、DNA的复制 二、DNA的损伤修复 三、DNA的突变 提要 不要盲目相信权威，哪怕他是诺贝尔奖得主，要有自己的自由思维。--------- 教书感悟 DNA半保留复制 3、 结果与分析： E.coli DNA复制起始点和终止点的位置。 真核生物中真核生物染色体DNA是线性双链分