考研科目,动物生物化学第17章核酸技术.pptVIP

1 DNA重组技术 （1）重要的工具酶 （2） 载体 （3）DNA重组的过程 （1）重要的工具酶 它能够识别、切割双链DNA分子中的特定序列，这些特定序列多数为反向重复序列，一般长度是4、5或6bp。 粘性末端：识别序列对称轴，左右两边切开， 形成凸出部分。 如 EcoR I: 5’ ---GAATTC CTTAAG---3’ ② DNA连接酶 相邻DNA的5′磷酸基团和3′羟基形成 磷酸二酯键。 目前使用的连接酶有两种： 大肠杆菌DNA连接酶： 黏性末端连接； T4 连接酶： 黏性和平齐末端连接。 ③ 碱性磷酸酶 催化DNA和RNA5′－磷酸基团水解， 产生5′－羟基末端，减少载体自身的环化。 （2）载体 能将外源DNA带入宿主细胞，进行复制扩增或最终使外源基因得以表达的自主 DNA，称为载体（vector）。分为： ① 克隆载体：用于基因的复制、扩增、测序等； ② 穿梭载体：原核与真核细胞间遗传物质的转移； ③