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原核与真核生物mRNA的特征比较;mRNA的组成：;原核生物mRNA的特征;半衰期短;2. 许多以多顺反子的形式存在： 原核细胞的mRNA(包括病毒)有时可以同时编码几个多肽。;单顺反子mRNA (monocistronic mRNA): 只编码一个蛋白质的mRNA。 多顺反子mRNA(polycistronic mRNA): 编码多个蛋白质的mRNA。; 3. 原核生物mRNA的5’端无帽子结构，3’端没有或只有较短的多聚（A）结构。; 4. 原核生物常以AUG（有时GUG，甚至UUG）作为起始密码子; 真核生物几乎永远以AUG作为起始密 码子。;单顺反子形式存在。 5’端存在“帽子”结构。 绝大多数具有多聚(A)尾巴。;真核生物mRNA的结构模式;“基因”的分子生物学定义是：产生一条多肽链或功能RNA所必需的全部核苷酸序列！ A gene can be defined as following: The entire nucleic acid sequence that is necessary for the synthesis of a functional polypeptide or RNA molecule. ;真核生物mRNA的5’端存在“帽子”结构。 真核生物基因转录一般从嘌呤起始，其5’端大都经过修饰。;5’Capping;真核生物mRNA的“帽子”结构; mRNA的帽子结构常常被甲基化;帽子结构的功能; 2. 绝大多数真核生物mRNA具有多聚(A)尾巴。 除组蛋白基因外，真核生物mRNA的3’末端都有多聚(A)序列，其长度因mRNA种类不同而变化，一般为40-200个左右。 由多聚(A)聚合酶催化的； 它是在转录后加上的； Poly(A)被特异的蛋白质PABP结合。;在高等生物中(酵母除外)在poly(A)上游11-30nt处有一特殊序列AAUAAA，这一序列是高度保守的, 对于初级转录产物的准确切割及加多聚(A)是必需的 。 ;真核生物mRNA中的加多聚A反应;多聚腺苷化(polyadenylation)反应要经过2个阶段;是mRNA由细胞核进入细胞质所必需的形式；;Poly-A in the 3’ end promotes the efficient recycling of ribosomes;Poly (A) -;Poly(A)+ RNA can be separated from other RNAs by fractionation on Sepharose-oligo(dT).;在动物细胞中，mRNA的表达需转录、修饰、加工、核质转运和翻译。;内含子的剪接、编辑及化学修饰;RNA中的内含子;部分人类基因中内含子序列所占的比重分析; 剪接 (Splicing);5’加“帽”和 3’酶切加多聚腺苷酸;RNA splicing 可通过体外凝胶电泳进行分析;RNA加工过程及其生理功能;真核基因平均含有8-10个内含子，前体分子一般比成熟mRNA大4-10倍。; 例如： 地中海贫血病人的珠蛋白基因中，大约有1/4的核苷酸突变发生在内含子的5’或3’边界保守序列上，或者直接干扰了前体mRNA的正常剪接。;生物体内的各种内含子; 断裂基因发现不久，Crick（1978年）就提出了一系列发人深思的问题：; Chambon等分析比较了大量结构基因的内含子切割位点，发现有2个特点：;?脊椎动物前体mRNA中常见内含子 剪接所必需的保守序列; GU-AG法则（GU-AG rule）不适用于线粒体、叶绿体的内含子，也不适用于酵母的tRNA基因 。;除了边界序列之外，外显子与内含子交界处的序列，内含子内部的部分序列都有可能参与内含子的剪接。;核mRNA结构特点;核mRNA的剪接;细胞核中的小分子RNA称为细胞核小RNA（small nuclear RNA, snRNA); 位于细胞质中的称为细胞质小RNA (small cytoplasmic RNA, scRNA)。 在自然状态下，它们以核糖核蛋白颗粒（SnRNP和scRNP）的形式存在，俗称snurps和scyrps。 在核仁中也存在着一类小的RNA，称为核仁小RNA (small nucleolar RNA, snoRNA),它们在rRNA的加工中起作用。 snRNA参与剪接过程，并与其它蛋白一起构成一个大的颗粒复合体,称为剪接体(splicesome)。;Spliceosome (剪接体);1. Recognizing the 5’ splice site and the branch site. 2. Bringing those sites together