小麦蛋白磷酸酶2A基因TaPP2AbB″-α启动子的克隆及表达分析.pdfVIP

作物学报 ACTA AGRONOMICA SINICA 2016，42(9)：1282—1290 http：／／zwxb．chinacrops．org／ ISSN 0496—3490；CODENTSHPA9 E—mail：xbzw@chinajourna1．net．en DoI：10．3724／SP．J．1006．2016．01282 小麦蛋白磷酸酶 2A基因TaPP2AbB-a启动子的克隆及表达分析 康 珩 ，2 李 昂2 刘惠民 景蕊莲2， 山西大学生物工程学院，山西太原 030006； 农作物基因资源与基因改良国家重大科学lT程 ／中国农业科学院作物科学研究所 北京 100081 摘 要：植物蛋 白磷酸酶 2A (proteinphosphatase2A，PP2A)由结构亚基 A、调节亚基 B和催化亚基 C组成，在应答 逆境胁迫途径中发挥着重要作用。小麦基因TaPP2AbB一“是调节亚基亚家族B，，的成员，过量表达该基因可以促进拟 南芥的根系生长及侧根发育，在盐胁迫和渗透胁迫条件下的作用更显著。本研究从小麦(TriticumaestivumL．)抗旱品 种 “旱选 l0号”基因组中克隆了TaPP2AbB”．6c基因的启动子 PB”a，序列长度为 1899bp，含有TATA—box和CAAT-box， 以及响应干旱和渗透胁迫的顺式作用元件 EECCRCAH1(一1058bp至一1052bp)、GCCCORE(一1073bp至一1068bp) 和MYCCONSE(一1179bp至一1174bp)。将启动子PBcc和5种 5r端缺失启动子片段与报告基因GUS(p—glucuronidase) 连接后转化拟南芥，组织化学染色结果显示 PB”0【在植株的叶片和根中均有表达。5端缺失分析表明缺失片段 PBrot．1545和 PB ．1389具有启动子活性，活性区域位于一1389bp和一946bp之间。GUS定量分析结果显示，在盐和 渗透胁迫条件下，PBa、PBrot一1545和 PB”ot．1389的活性显著上升。本研究表明PB 具有较强的启动子基本活性，并 且在盐胁迫及渗透胁迫条件下活性显著上升，该结果为合理选用启动子改 良作物提供了依据。 关键词：小麦；蛋白磷酸酶2A；启动子；顺式作用元件；GUS组织化学染色；GUS定量分析 CloningandExpressionAnalysisofProteinPhosphatase2AGeneTaPP2AbB r_cz PromoterinW heat YIHeng，-，LIAng2 LIU Hui．M in ，andJING Rui．Lian， ， CollegeofBioengineering，ShanxiUniversity,Taiyuan030006，China；NationalKeyFaciliyt forCropGeneResourcesandGeneticImprovement／ InstituteofCropScience，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Beijing100081，China Abstraet：Proteinphosphatase2A (PP2A)isaheterotrimericprotein，consistingofascaffoldingsubunit(A)，acatalyticsubunit (C)，andamemberoffourfamiliesofregulatorysubunits(B)．PP2Aplayssignificantrolesinthepathwayrespondingtoabiotic stressesinplants． 尸：P bB-d，amemberofregulatorysubunitB”inwheat(TriticumaestivumL．)，enhancedrootdevelopment andcoulddevelopmorelateralrootsinthegeneoverexpressedArabidopsis．especiallyundertheosmoticstressesofmannitoland NaC1．Inordertoelucidatetranscriptionalregulatorymechanism ofth