脓汁和粪便标本中病原菌的检测-6课件.pptVIP

医学微生物学实验综合性实验一 脓汁和粪便标本中病原菌的检测（六） 药敏实验结果分析 糖发酵、动力实验结果分析 玻片凝集试验 高压蒸汽灭菌 细菌综合性实验总结 实验报告撰写 细菌感染的检查方法和防治原则（录像） 洗刷 常用药敏试验纸片判断标准P21 抗菌药物 纸片含药量 抑菌圈直径(mm) 耐药 中度敏感 敏感 青霉素G(葡萄球菌) 10单位 ≤28 - ≥29 链霉素 10微克 ≤11 12～14 ≥15 庆大霉素 10微克 ≤12 13～14 ≥15 四环素 30微克 ≤14 15～18 ≥19 氯霉素 30微克 ≤12 13～17 ≥18 磺胺 300微克 ≤12 13～16 ≥17 抗菌素药敏试验纸片法结果 G+球菌对青霉素和链霉素敏感。 G-杆菌对青霉素耐药，对链霉素敏感。 G+球菌和G-杆菌对广谱抗菌素庆大霉素都敏感。 糖发酵、动力试验结果判断 反应现象 结果描述 符号 培养基变色无气泡 分解×糖产酸不产气 ＋ 培养基变色有气泡 分解×糖产酸又产气 ⊕ 培养基不变色 不分解×糖 － 细菌扩散生长,培基混浊 细菌有鞭毛 ＋ 沿接种线生长,培基清澈透明 细菌无鞭毛 － 肠道杆菌科各菌属生化反应鉴别表 葡萄糖 乳糖 麦芽糖 甘露醇 蔗糖 半固体 埃希菌属 ⊕ ⊕ ⊕ ⊕ √ + 志贺菌属 + √ √ +/- -/+ - 沙门菌属 ⊕/+ - ⊕ ⊕ - + 霍乱弧菌 + - + + + + 变形杆菌属 ⊕ - √ - √ + 注： + 产酸或阳性， ⊕ 产酸产气，- 阴性， +/- 多数阳性， -/+ 多数阴性 √ 不确定。 常见肠道感染细菌主要生化反应特征 葡萄糖 乳糖 半固体（动力） 大肠埃希菌 ⊕ ⊕ + 福氏志贺菌 + - - 伤寒沙门菌 + - + 霍乱弧菌 +★ - + 幽门螺杆菌 不分解糖类 + 变形杆菌 ⊕ - + ★产酸能迅速杀死该菌。 实结果错误可能性 纯培养时，菌落挑错了。 无菌操作不严格，污染杂菌。 接种时未协调好，接种错误。 玻片凝集试验Slide Agglutination Test 在适量电解质存在的情况下，颗粒性抗原(细菌)与特异性抗体混合，如果比例合适，则出现肉眼可见的凝集块，称为凝集反应。 用于细菌的抗原分析、鉴定及分型，也可应用已知细菌检查未知血清的抗体。 诊断血清与待检测细菌混合→细菌凝集→阳性→报告：检出××细菌。 玻片凝集试验原理 凝集反应的机制是由于抗原与其相应抗体间存在着相对应的极性基。极性基的相互吸附，使抗原外周的水化膜除去，由亲水溶胶变成憎水溶胶。 电解质具有降低电位的作用，使抗原颗粒间的排斥力消除，从而产生了凝集现象。 玻片凝集反应实验步骤 取洁净的载片一张，设试验与对照区。 滴加福氏志贺菌诊断血清15ul，置于试验区中心，滴加生理盐水15ul，置于对照区中心。 用接种环取粉红色菌苔（2个菌落的菌量），分别研磨于盐水或血清内，混合均匀。 将玻片反复旋转或倾侧、菌液充分混匀，凝集速度更快、结果更清楚。 观察是否有凝集块出现，如有则记为阳性，没有则记为阴性。 生物安全警告 本次实验操作，可产生几十个微生物气溶胶颗粒。 气溶胶粒径＞100um沉降很快,＜50um在0.4s内扩散开,＜5um通过呼吸道直接到达肺泡。 Pike博士对实验室感染统计分析结果发现，不明原因的感染高达82%，大多数是气溶胶在空气中扩散引起的。 实验时应坐着，在火焰周围10～20厘米内操作，保持安静、有序，尽量少说话、少走动，以免感染病原菌。 灭菌 药敏试验平板、动力试验半固体琼脂、微量糖发酵管→高压蒸汽灭菌 ! 综合性实验一 实验总结 采用平板划线分离法，从浓汁标本中分离出黄色和白色两种菌落。显微镜下，这两株细菌均为G+球菌，排