第三讲生物信息的传递上---转录.ppt

分 子 生 物 学 (Molecular Biology) 陈爱群 主讲 第三章 生物信息的传递（上） ——从DNA到RNA 基本概念 转录起始： RNA聚合酶、启动子 转录的基本过程 转录后加工 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 RNA合成与DNA合成异同点 一、基本概念 以DNA为模板，在依赖于DNA的RNA聚和酶催化下， 以4中rNTP（ATP、CTP、GTP和UTP）为原料，合成 RNA的过程。 在有些病毒中，RNA也可以指导合成RNA或逆转录 成DNA 参与转录的物质 原料: NTP (ATP, UTP, GTP, CTP) 模板:DNA 酶: RNA聚合酶 其他蛋白质因子 转录的不对称性： 在RNA的合成中，DNA的二条链中仅有一条链可作为转录的模板，称为转录的不对称性。 基本概念 转录起始：RNA聚合酶、启动子 转录的基本过程 转录后加工 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 RNA合成与DNA合成异同点 结构基因：一般指编码蛋白质的基因。广义上也包括编码RNA的基因。能将携带的遗传信息转录给mRNA,再以mRNA为模板合成具有特定氨基酸序列的蛋白质。 调节基因：控制结构基因表达的基因。如编码激活蛋白或阻遏蛋白的基因。能使结构基因需要某种酶时就合成某种酶,不需要时,则停止合成，它对不同染色体上的结构基因有调节作用。 操纵基因：与一个或者一组结构基因相邻近，并且能够与一些特异的阻遏蛋白或激活蛋白相互作用，从而控制邻近的结构基因表达的基因。操作基因与一系列受它操纵的结构基因合起来就形成一个操纵子。 二、参与转录起始的关键酶与元件 （一） RNAσ聚合酶 大肠杆菌RNA聚合酶的组成分析 E. coli RNA polymerase RNA聚合酶与DNA聚合酶的区别 （二） 启动子(promoter) ● 原核生物启动子结构 典型启动子的结构 -35 -10 转录起点 TTGACA 16-19bp TATAAT 5-9bp ● 真核生物启动子 真核有三种不同的启动子和有关的元件 启动子Ⅱ最为复杂，它和原核的启动子有很多不同 真核生物启动子的结构 1、核心启动子 ●定义：指保证RNA聚合酶Ⅱ转录正常起始所必需的、最少的DNA序列，包括转录起始位点及转录起始位点上游TATA区 2、上游启动子元件 ●包括CAAT盒（CCAAT）和GC盒（GGGCGG）等 SV40 早期启动子 组蛋白H2B 增强子：增强基因启动子工作效率的顺式作用序列，能够在相对于启动子的任何方向和任何位置(上游或下游)上都发挥作用。增强子是通过启动子来增加转录的。有效的增强子可以位于基因的5’端，也可位于基因的3’端，有的还可位于基因的内含子中。增强子的效应很明显，一般能使基因转录频率增加10～200倍，有的甚至可以高达上千倍。 增强子特点 增强子提高基因转录效率，可以远距离起作用， 增强子的作用与其序列的正反方向无关，将增强子方向倒置 依然能起作用。而将启动子倒置就不能起作用。 顺式调节，只调节统一染色体上的靶基因 无物种和基因的特异性 具有组织特异性 有相位性 作用与DNA构象有关 有的增强子对外界环境产生反应（诱导性） （三） 转录起始复合物 原核生物转录起始复合物 转录因子 转录复合体 TBP TAFs TFIIA TFIIB TFIIF Pol II TFIIE RNA pol Ⅱ的转录起始 基本概念 转录起始： RNA聚合酶、启动子 转录的基本过程 转录后加工 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 RNA合成与DNA合成异同点 三、转录的基本过程 1、起始位点的识别：RNA聚合酶与启动子DNA双链相互作用并与之相结合的过程。 3、RNA链的延伸 ● ?亚基脱落，RNA–pol聚合酶核心酶变构，与模板结合松弛，沿着DNA模板前移； ●在核心酶作用下，NTP不断聚合，RNA链不断延长。 4、转录终止 不依赖?因子的终止 终止位点上游一般存在一个富含GC碱基的二重对称区，RNA形成发夹结构； 终止效率与二重对称序列和寡聚U的长短有关，长度 效率 依赖?因子的终止 基本概念 转录起始： RNA聚合酶、启动子 转录的基本过程 转录后加工 原核生物与真核生物mRNA的特征比较