第九章原核生物的基因表达调控6.pptVIP

第九章  原核生物的基因表达调控 基因表达 基因表达的时间性及空间性 基因表达的方式 组成性表达 适应性表达 诱导性表达 阻遏 协调表达 ●原核生物基因表达调控的特点 主要是适应性调节 主要是转录水平的调节 以操纵子为单位，有正、负调控两种机制 因细菌细胞对营养的适应 分解代谢：碳源首先是葡萄糖，其它碳源必须先分解为葡萄糖，才能利用。 合成代谢：当培养基中含某种氨基酸时，有关这种氨基酸生物合成的酶类几乎完全缺失。 别乳糖是lac操纵子(乳糖操纵子)转录的活性诱导物，人们发现一个合成的、结构上类似于别乳糖、不能被β-半乳糖苷酶水解的异丙基β-D硫代半乳糖苷（isopropyl thiogalactoside：IPTG）起着lac操纵子的一个诱导物的作用，所以IPTG常用于诱导含有使用了lac启动子的质粒载体的细菌中的重组蛋白的表达。 当培养基中有葡萄糖存在时，cAMP浓度较低，cAMP与CAP蛋白不能形成复合物，也就不能结合到CAP位点，lac基因的转录水平较低。 由此可见，对lac操纵子来说CAP是正性调节因素，lac阻遏蛋白是负性调节因素。 CAP对RNA聚合酶的作用 直接作用于RNA聚合酶， 作用于DNA，改变其结构，以协助RNA聚合酶结合 与DNA结合后引起DNA呈程90度弯曲使CAP能与启动子上的RNA接触 ●协调调节(coordinate regulation) 负性调节与正性调节协调合作 阻遏蛋白封闭转录时，CAP不发挥作用 如没有CAP加强转录，即使阻遏蛋白从P上解聚仍无转录活性 葡萄糖/乳糖共同存在时，细菌优先利用葡萄糖 葡萄糖可降低cAMP浓度，阻碍其与CAP结合从而抑制转录 结论：lac操纵子强的诱导作用既需要乳糖又需缺乏葡萄糖 ☆ trp操纵子的结构 ☆ 启动子调控——阻遏系统 ☆ 弱化子（衰减子）调控 trp操纵子的结构特点: 阻遏物基因trpR（89′）和结构基因 trpEDCBA） 不紧密连锁； 操纵基因在启动子区域内 启动子、操纵基因不直接和结构基因毗邻，而 和前导顺序直接相联 有衰减子结构，在合成代谢的操纵子的前导 内，可以辅助阻遏作用进行转录调控 ☆启动子调控——阻遏系统 色氨酸操纵子的两种调控方式 粗调：可阻遏的负调控，即由辅阻遏物（色氨酸）和阻遏蛋白R构成的活性阻遏复合物结合到操纵基因上，由于操纵基因和启动子的重叠，造成RNA聚合酶受阻，操纵子不能转录，控制了转录的起始。 细调：衰减系统，通过核糖体对mRNA前导序列的结合，是否形成终止子结构对转录终止进行调控，控制转录是否进行下去。 前导序列的特点 某些区段富含GC，GC区段易形成茎环二级结构，末端有8个U的区段构成一个不依赖于ρ 因子的终止信号，能使mRNA合成提前终止，产生139个核苷酸长度的前导RNA。 前导序列中在10、11位有并列两个色氨酸密码子 含4个互补区段，1和2、2和3、3和4均能互补配对形成发夹结构A、B和C。其中1区处于14个氨基酸的前导肽序列中。若形成A、C发夹结构，则转录终止，若形成B发夹结构，则转录继续，而发夹结构形成那种形式取决于外界trp含量。 细菌其他氨基酸合成系统的许多操纵子（如组氨酸、苏氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸等操纵子）中也有类似的衰减子存在。 阻遏蛋白的负调控作用只能使转录不起始，对于已经开始了的转录，则只能通过衰减作用使基因的表达停顿下来。 阿拉伯糖操纵子是调控阿拉伯糖分解代谢所需酶系的操纵子。它具有正调控和负调控的功能。 参与阿拉伯糖分解代谢的酶系共有三个操纵子编码，这三个操纵基因是：araBAD、araE和araF。它们由一个共同的araC基因产物进行调控。 ara BAD：包括三个基因：araB、araA和araD。分别编码L-核酮糖激酶、L-阿拉伯糖异构酶和L-核酮糖-5-磷酸-4-表面异构酶。 ara E和ara F：编码膜结合蛋白，与阿拉伯糖的结合与转运有关。 调控方式 ☆ 当存在Ara和Glu时，araC 转录少量C蛋白并与araO1结合，反馈性抑制araC 的转录。 ☆当有Ara而无Glu时，Ara可作为糖源。此时Ara与少量的C蛋白结合，形成诱导型C蛋白---- Cind，它作为正调控因子与araI 结合，促进了araPBAD 的转录，产生了3种酶，促进Ara的分解。 ☆当无Ara或用完后， C蛋白（Crep