利用光学多通道分析仪与分光光度计测定叶绿素紫外-可见光区吸收光谱.pdfVIP

维普资讯 第 25卷 第 12期 物 理 实 验 VoL25 NO．12 2005年 12月 PHYSICSEXPERIM ENTATION Dec．．2005 利用光学多通道分析仪与分光光度计测定 叶绿素的紫外一可见光区吸收光谱 刘 畅，王世才 ，卢东昱 (中山大学 物理学系，广东 广州 510275) 摘 要 ：应用分析化学 中常用的吸光光度法 ，通过光学多通道分析仪和紫外一可见分光光度计对叶绿素提取液和叶 绿素 晶体分别进行 了紫外一可见光区吸收光谱的探测 ，并对其吸收曲线进行 了分析和研究．根据实验结果对文献 中的一 些数据进行 了讨论． 关键词 ：吸光光度法 ；叶绿索 ；紫外一可见吸收光谱 中图分类号 ：0433．51 文献标识码 ：A 文章编号 ：lOO5—4642(2005)12-0038-04 捕光物质 的叶绿素在可见光区具有吸收峰．本文 1 引 言 中的实验对叶绿素提取液及叶绿素 a和 b晶体的 用分光光度计研究透 明物质的吸光 曲线的分 丙酮溶液进行了吸光光度法分析 ，并对其 吸收 曲 析方法称为吸光光度法 [1]，该方法是一种用于测 线进行了分析和研究． 定试样 中微量组分 的定量分析方法．实验时，测 2 实验仪器简介 量某种物质对不 同波长单色光的吸收程度 ，以波 长为横坐标 ，吸光度为纵坐标作图，得到该物质的 WGD一6型光学 多通道分析仪 [2由光栅单色 光吸收曲线．实验证明，溶液对光 的吸收程度与 仪、CCD接收单元、扫描系统、电子放大器 、A／D 溶液浓度 、液层厚度及入射光波长等因素有关． 采集单元和计算机组成，如图 1所示．入射狭缝 、 Lambert和 Beer分别 于 1760年 和 1852年 研究 出射狭缝均为直狭缝，宽度范围为 O～2mm连续 了光的吸收与液层厚度及溶液浓度 的定量关 系， 可调．溴钨灯光源发出的光束通过宽度为 10mm 二者合称 Lambert—Beer定律 [1]． 平面光波在各 向同性的均匀媒质 (溶液)中传 播，定义 A=In(J。／1)为吸光度，其 中J。和 J分别 品溶液的 是入射光和 出射光的光强 (J—J。e- )，则 Beer 定律的另一数学形式为：A—aCl，其 中a为常数 ， C为溶液浓度 ，Z是样 品的厚度L2]．当溶液浓度很 大时 ，分子 间的相互影响不可忽 略，Beer定律不 成立 ． 有机化合物的紫外一可见吸收光谱，是化合物 中外层 电子 (包括成键 电子和非成键 电子)跃迁 的 肉眼观察或照相 结果 ，故又称电子吸收光谱 “]．光合作用是地球 上最重要的生物化学反应 ，其作用是吸收太 阳辐 M ．反射镜 M。．准光镜 M。．物镜 M ．转镜 G．平面衍射光栅 S．入射狭缝 S。．CCD接收位置 射并将其转化成绿色植物的生物能．太阳光在可 S3．观察窗或 出射狭缝 见光区的强度最大 (对应于 6000K黑体辐射的 图 1 WGD-6型光学多通道分析仪原理示意图 强度峰值)，经过漫长的自然选择，作为光合作用 收稿 日期 ：2005—03—22；修改 日期 ：2005—08一l1 资助项 目：国家理科人才培养基地资助项 目 作者简介 ：刘 畅 (1982一)，男。广东广州人 ，中山大学物理学系 2002级物理学专业本科生 通讯联系人 ：卢