3-4酶的活性调节.ppt.ppt

3 酶（enzyme） 3.6 酶活性的调节 酶原激活 同工酶 多酶复合物和多功能酶 别构酶 共价修饰 酶工程（介绍） 乳酸脱氢酶同工酶形成示意图 不同组织中LDH同工酶的电泳图谱 （一）多酶复合物，如乙酰CoA羧化酶； （二）多功能酶 正协同效应(positive cooperative effect) ：可增加反应速度的作用。具有这种效应的物质为正调节物（变构激活剂）。多为别构酶的底物。 负协同效应(negative cooperative effect) ：降低反应速度。具有这种效应的物质为负调节物（变构抑制剂）。常为代谢反应序列的终产物。 正调节物与酶结合后，酶构象的变化有利于底物分子与酶结合，使酶促反应速度依赖于底物浓度的变化更为敏感。正调节物使S型曲线左移，饱和量的正调节物可将S形曲线转变为双曲线。 负调节物与变构酶结合后，不利于随后的酶与底物的结合，使酶促反应速度依赖于底物浓度不敏感，而且很难达到最大反应速度。负调节物使S形曲线右移。 在变构酶的S形曲线中,底物浓度稍有升高，则酶活性迅速上升，使得酶对底物浓度变化非常敏感，因此可以快速调节细胞内底物浓度和代谢速度。 负调节物常是代谢途径的终产物，变构酶常处于代谢通路的开端，通过反馈抑制，可以及早地调节整个代谢通路，减少不必要的底物消耗。 实例：天冬氨酸转氨甲酰酶（anspartate transcarbamoylase，ATCase） ATCase的结构及其催化链的别构过渡作用 别构酶的齐变模型 别构酶的序变模型 六 酶工程简介（了解） 固定化酶 溴化氰亚氨碳酸基偶联法 戊二醛交联法 酶的改造和模拟 人工模拟酶?-benzyme 生物酶工程示意图 Summary 酶的基本性质和特点 酶的组成 酶的分类和命名 大肠杆菌从天冬氨酸和氨甲酰磷酸经过序列反应，最终生成CTP。 ATCase是此序列反应的第一个酶 无催化活性构象(T-型) C C C C C C R R R R R R 有催化活性构象(R-型) C C C C C C R R R R R R ATP（正效应剂） CTP（负效应剂） S S S S S S S S S S T状态（对称亚基） R状态（对称亚基） S S S S 对称亚基 对称亚基 齐步变化 R型：有利结合底物或调节物，属于松弛型。 T型：不利结合底物或调节物，属于紧张型。 齐变：各亚基在同一时间内均处于相同的构象状态。 亚基之间的联系 S S S S S S S S S S S S S S 亚基全部处于R型 亚基全部处于T型 依次序变化TR型 序变： 当配体不存在时，别构酶只有一种构象状态存在T，只有配体与之 结合才诱导T态向R态转变。当配体与一个亚基结合后，可引起该 亚基构象发生变化，并使领近亚基易于发生同样构象变化，即影 响对下一个配体的亲和力。当第二个配体结合后，又导致第三个 亚基类似变化，直到所有亚基都处于同样的构象。 五、共价修饰 一、化学酶工程： 亦称初级酶工程 ?天然酶 ? 固定化酶 ?化学修饰酶 ?化学人工酶 二、生物酶工程：从基因水平改造或设计新酶。 将酶学和工程学相结合，产生了酶工程(enzyme engineering)这样一个新的领域。酶工程主要研究酶的生产、纯化、固定化技术、酶分子结构的修饰和改造以及在工农业、医药卫生和理论研究等方面的应用。 将水溶性酶用物理或化学方法处理，固定于高分子支持物(或载体)上而成为不溶于水，但仍有酶活性的一种酶制剂形式，称固定化酶(immobilized enzyme)。 包埋法 吸附法 共价偶联法 交联法 OH OH BrCN H2O O O C=N-E O-CO-NH-E OH O-C-NH-E NH OH H2N-E （多羟基载体） O-CONH2 OH （惰性） O O C=NH （活泼） O—C —N OH OHC(CH2)3CHO 戊二醛 H2N-E N -HC=N-E-N=CH（CH2）3-CH=N- E- N CH CH 酶的改造：功能基团的化学修饰酶 酶蛋白侧链的化学修饰 酶分子内或间的交联反应 酶的模拟：根据酶作用的原理摸拟酶的活性中心和催化机理，用化学方法制备结构较简单,高效、高选择性、稳定性能好的新型催化剂,可以是无机化合物、有机化合物或小肽。 * * 一、酶原激活 原 二、同工酶 多肽 亚基 mRNA 四