第一轮复习第1讲基因工程.pptVIP

反转录法 化学合成法。 DNA复制 PCR技术 基因克隆 场所 细胞核 生物体外 细胞内 酶 解旋酶、 DNA聚合酶 Taq酶 限制酶、连接酶 载体 不需要 不需要 需要 遵循原则 碱基互补配对 碱基互补配对 碱基互补配对 结果 DNA分子 DNA分子片段 DNA分子片段 DNA复制、PCR技术与基因克隆 2．基因表达载体的构建 (1)目的： 使目的基因在受体细胞中稳定存在，并可以遗传给下一代，并使目的基因能够表达和发挥作用。 (2)组成： 目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因。 ①启动子： 一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶识别、结合的部位,驱动基因转录出mRNA。 ②终止子： 一段有特殊结构的DNA短片段，位于基因的尾端，作用是使转录过程停止。 ③标记基因： 一般为抗生素抗性基因或荧光基因等，其作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因(目的基因是否导入成功)。 ④目的基因: 是插入的外源基因 (3)构建方法 (2) 导入方法 受体细 胞种类 方法 植物细胞 ①农杆菌转化法：目的基因插入Ti质粒的T－DNA→转入农杆菌→导入植物细胞→稳定维持和表达　②基因枪法　③花粉管通道法 动物细胞 显微注射法：目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→新性状动物 微生物细胞 感受态细胞法： C