2015届高考生物一轮复习讲义血红蛋白的提取与分离人教版.docVIP

2015届高考生物一轮复习　血红蛋白的提取与分离　 1．血红蛋白的提取和分离原理 蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等，可以用来分离不同种类的蛋白质。 2．常用的蛋白质分离方法 (1)凝胶色谱法 ①识图 凝胶色谱法分离蛋白质的原理 ②分析比较列表如下： 蛋白质比较　　　 相对分子质量大 相对分子质量小 凝胶内部 排阻在凝胶颗粒外面，迅速通过 进入凝胶颗粒内部，被滞留 运动方式 垂直向下 垂直向下和无规则扩散运动 运动路程 较短 较长 洗脱次序 先流出 后流出 (2)电泳法原理 ①在一定pH下，一些生物大分子(如多肽、核酸等)可解离的基团会带上正电或负电，在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。 ②由于分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状不同，使带电分子产生不同的迁移速率，从而实现样品中各种分子的分离。 3．血红蛋白的提取和分离过程 4．结果分析与评价 (1)血红蛋白的提取和分离时红细胞分层不明显，可能是洗涤次数少、未能除去血浆蛋白的原因。此外，离心速度过高和时间过长，会使白细胞和淋巴细胞一同沉淀，也得不到纯净的红细胞，影响后续血红蛋白的提取纯度。 (2)凝胶的装填标准是紧密、均匀。如果色带均匀、狭窄、平整，说明凝胶色谱柱的性能良好。如果色谱柱出现纹路或是气泡，轻轻敲