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* 再生植株的形成途径 1、器官发生 概念:离体培养的组织、细胞在诱导条件下经分裂和增殖再分化形 成根和芽等器官的过程。 发生方式:有两种发生方式 (1)直接发生:由(具有初生分生能力的)外植体直接分化成器官的方式(由茎尖、腋芽、原球茎、块茎、鳞茎等器官发生) 。 (2)间接发生:由外植体(已分化的成熟组织)经脱分化形成愈伤组织后再分化形成器官的方式。 器官发生途径 胚胎发生途径 再生植株 * 再生植株的形成途径 2、胚胎发生(embryogenesis) 概念:由培养细胞诱导分化出具胚芽、胚根、胚轴的胚状结构,亦称胚状体。 发生来源方式:四种 (1)由外植体直接形成:下胚轴、子叶、茎表皮等外植体脱分化后可直接产生胚。 (2)由愈伤组织形成:愈伤形成胚胎发生丛(EC),可形成大量的胚状体 (3)由悬浮细胞形成; (4)由单倍体细胞形成。 * 完整植株的形成 外植体 脱分化 体细胞胚 愈伤组织 再分化 再分化 完整植株 器官发生(芽、根) * 第四节 培养细胞的遗传变异 一、培养细胞变异增多现象及其价值 通常将组培中的变异分为两类,即人工变异和自然变异。 人工变异是人为诱发的变异,一般具有一定的方向性,主要用于选育种的研究 (如秋水仙素、各种射线、太空辐射) ; 自然变异大多数没有方向性,以劣变为主,会给生产带来巨大的损失,应尽可能减少。 对于育种研究而言,应提高变异率以获得较多的变异材料,对于组培快繁而言,则必须使变异率降至尽可能低(5%以内)。 如果培养条件(包括培养基组成)不当,变异率可能会很高,例如40-60%甚至100%,远远高于田间栽培的变异率。 * 香蕉的组培快繁中,各个阶段都可能出现变异或异常的情况: 芽的表现:叶鞘肥大、变褐;芽细矮,叶鞘散开;叶鞘披散,新叶 细;芽白化,叶鞘散开;芽基部呈球状,颜色变褐;芽细长,叶 鞘散开;芽细白色,基部褐变;芽扁平,叶鞘散开。 芽苗的表现:矮化苗;白芽苗;豆芽苗;多分蘖苗;扭曲苗;披散 苗;畸形苗;叶片重叠苗;高节位生根苗。 袋苗的表现:缺绿株;特矮株;特高株;扭曲株。 其中,对产量影响最大的为:叶片扭曲株,叶片披散株,特矮株,高节位生根株,特高株和缺绿株。 * 二、影响变异的因素 1、基因型 物种,品种,嵌合体与否(如花叶姜),单倍体或二倍体。(马铃薯和菠萝可高达100%;棉花30-90%) 2、继代次数 香蕉:培养5代的变异率为2.14%,10代为4.2%,20代达100%(故不可超过1年) 。 蝴蝶兰:继代培养4年后,没有1株能够开花(丧失了成花能力),故每2年更换一次。 3、外植体类型:胚(胚器官等) 、茎段、茎尖其遗传最为稳定,不易发生变异,而高度分化的组织,如果实、叶片等,在培养过程中易发生变异(菠萝幼果愈伤组织变异率100%,冠芽愈伤组织7%)。 4、培养基与培养条件 影响很大,主要涉及:激素、蔗糖浓度、温度及温度的变幅等。 * 利用价值: 变异在种质资源保存上是不利的因素,但另一方面也有育种利用价值。如菊花的变异、香蕉的矮化等。 * 第四节 培养细胞的遗传变异 三、变异的遗传基础--染色体数目、结构变异及基因突变 ①、染色体未断裂,染色体数增加(多倍体); ② 、染色体未断裂,染色体数减少; ③ 、染色体断裂并引起染色体数增加; ④ 、染色体断裂但不引起染色体数目变化; ⑤、体细胞核内再复制; ⑥、基因突变; ⑦、转座子的作用。 (该部分自学,p36-37) * 四、克服变异的措施 1、严格控制继代次数 2、尽量使用温和的培养基及培养条件 3、选用适当的增殖方式(尽可能利用现成的生长点进行增殖和分化) 4、在离体培养的各阶段不断地检查和剔除变异材料 * 概念:利用物理因素(如x射线、 γ射线、紫外线、激光等)或化学因素(如亚硝酸、硫酸二乙酯等)处理生物,使生物发生基因突变。 原理: 利用辐射使植物染色体畸变,基因发生突变,从而产生新的形状. 优点:提高变异的频率,加速育种进程,大幅度地改良某些性状等。 缺点:难以控制突变方向,无法将多个优良性状组合。 应用:农作物育种——黑农五号大豆 (产量提高16%、含油量提高2.5%) 微生物育种——青霉素 (20单位/ml→50000单位/ml) * 第一章 细胞工程原理 概述 第一节 细胞全能性 1、细胞全能性概念的发展 2、植物活细胞具有生命的特征属性 第二节 脱分化与再分化 第三节 再生植株形成途径 1、器官发生 2、胚胎发生 第四节 培养细胞的遗传与变异 1、变异增多现象及其价值
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