项目十细菌生化检验技术.ppt

* 项目十 细菌生化检验技术 EIUSMOD 细菌的数值分类（聚类分类） 04 EIUSMOD 03 微型、简便、自动化检测技术（API细菌数值鉴定系统，Biolog全自动检测仪） EIUSMOD 02 分子生物学指标（DNA的碱基组成，即G+C mol%） EIUSMOD 01 生物分类的传统指标（形态、染色状况、营养类型、代谢产物等） 微生物的鉴定方法 一、微生物的生理生化反应 大分子物质水解实验 。 01 。 02 糖发酵实验 。 03 IMViC实验 。 04 酶实验 1. 淀 粉 水 解 试 验 倒平板 分区标记 接种 培养 观察 加卢戈氏碘液，观察无色透明圈 制固体淀粉培养基 枯草杆菌 大肠杆菌 自分离菌等 原理：淀粉遇碘为蓝紫色，在淀粉酶作用下，淀粉分解为小分子的糊精等物质，根据颜色变化判断淀粉水解情况。 2. 明 胶 液 化 试 验 134 页 标记明胶培养基试管 穿刺接种 20℃培养 观察（阳性和 阴性的区别） 制明胶培养基 原理：有些细菌具有明胶酶（亦称类蛋白水解酶），能将明胶先水解为多肽，又进一步将多肽水解为氨基酸，明胶失去凝胶性质，使培养基由固态变为液态 25℃以下明胶为固体形式存在。 大分子物质 微生物 细胞 小分子物质 明 胶 培 养 基 25℃以下 3.糖发酵试验 糖发酵试验是常用的鉴别微生物的生化反应，在肠道细菌的鉴定上尤为重要。利用微生物分解糖类的能力来对其进行鉴别。 有些细菌能分解某种糖产生有机酸（如乳酸、醋酸、丙酸等）和气体（如氢气、甲烷、二氧化碳等）；有些细菌只产酸不产气。例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气；伤寒杆菌分解葡萄糖产酸不产气，不能分解乳糖；普通变形杆菌分解葡萄糖产酸产气，不能分解乳糖。 发酵培养基配方：蛋白胨，指示剂（溴甲酚紫），倒置的德汉氏小管和不同的糖类。当发酵产酸时，溴甲酚紫指示剂可由紫色（pH6.8）变为黄色(pH5.2)。气体的产生可由倒置的德汉氏试管中有无气泡来证明。 实验步骤 糖类物质 细菌 有机酸 气体 溴甲酚紫指示剂 黄色 pH6.8 pH5.2 德 汉 氏 小 管 实验步骤 糖 发 酵 试 验 接种 培养 观察 各试管颜色变化及德汉氏小 管中有无气泡 标记 发酵培养基名称和所接种细菌菌名 IMViC 吲哚(indol test)试验 甲基红(methyl red test)试验 伏-普(Voges-Prokauer test)试验 柠檬酸盐(citrate test)试验 这四个试验主要是用来快速鉴别大肠杆菌和产气肠杆菌， 多用于水的细菌学检查 4.IMVC实验原理 蛋白胨中 的色氨酸 吲哚（无色） 丙酮酸 对二甲基氨基苯甲醛 玫瑰吲哚 细菌 色氨酸酶 （1）吲哚（靛基质）实验 吲哚试验原理 *