第4章屏障系统实验动物饲养与管理.ppt

第四章 屏障系统实验动物饲养与管理 第一节 基础知识 屏障环境设施适用于饲育无特定病源体(Specific Pathogen Free)级实验动物。动物来源于无菌、悉生动物或SPF动物种群。进入屏障的人、动物和物品必须经过严格的微生物控制。空气经低效、中效、高效过滤器进入屏障系统，结净度达到10000级，利用空调送风系统形成清洁走廊、动物房、污染走廊、室外的静压差梯度，以防止空气逆向形成的污染。空气、人、动物、物品的走向采用单向流通路线。空气经初效、中效和高效过滤器静茹动物饲养室或实验室，检测尘埃粒子数在350/升，该系统利用空调送风系统形成清洁走廊、饲育室或实验室、污染走廊灯不同压力的净化区，净化区内形成梯度压差，一般压差为20Pa。工作人员工作时要在淋浴后穿着无菌工作服、口罩、帽子以尽量减少和动物的直接接触。  实验动物环境控制的重要性 实验动物几乎终身被限制在一个极其有限的环境范围内生活，这种环境就成了实验动物赖以生存的条件。动物实验在实验前和实验中控制各种环境因素十分重要。甚至可以说没有环境控制就没有动物实验。 动物对实验处理的反应可用以下公式表示： R = （A+B+C）× D + E R：实验动物的总反应 A：动物种的共同反应 B：品种品系特有的反应 C：个体反应（个体差异） D：环境影响 E：实验误差 环境因素与动物的总反应呈正相关，要尽量减少D的变化，排除实验处理以外的影响。 实验动物环境因素的分类 1、气候因素：温度、湿度、气流、风速等； 2、理化因素：氧、二氧化碳、粉尘、臭味、噪音、照度、杀虫剂、消毒剂、有害化学物质等； 3、居住因素：房屋、笼具、垫料等； 4、营养因素：饲料、水等； 5、生物因素： 同种生物因素：社会地位、势力范围、咬斗和饲养密度等 异种生物因素：微生物、人和其它动物的关系 环境对实验动物质量和动物试验结果的影响是多因素联合作用的结果。多种因素是共存的。所以在论述实验动物的环境时，应该按复合环境（environmental complex)状态加以考虑。 各种环境因素对实验动物质量和动物试验结果的影响 1、温度： 最适宜温度20-25℃，温差：3或4℃ 温度对动物的影响： 新陈代谢：低温时新陈代谢增加，摄食增加 散热：除灵长类，其他动物汗腺不发达或无汗腺，高温时散热困难，难以维持体温恒定 脏器重量：负相关 生殖：高温时雄性睾丸萎缩，精子活力下降；雌性动物性周期紊乱，泌乳下降 对动物实验的反应性 实验动物的温度标准范围： 2、湿度： 相对湿度， 实际水蒸气分压力 相对湿度（%） = ------------------ × 100% 饱和水蒸气分压力 适宜的相对湿度是40%--70%。 高温高湿导致机体蒸发散热受阻。高湿利于微生物繁殖和传播。 湿度过低可导致粉尘飞扬，而微生物主要附着在粉尘上，动物室内变态反应原的含量随湿度的下降而上升。 低湿，散热增加，产热增加，摄食增加 低湿，大鼠环尾症 3、气流与风速 换气次数，气流速度，压强梯度 气流速度和散热正相关，实验动物体表面积与体重的比值较大，对气流速度更敏感。 气流速度过大或气流直吹，动物体表散热过大。气流速度小，散热慢。0.1-0.2m/s 换气次数，洁净程度越高，要求换气次数越多。 屏障环境：10-20次/h 隔离环境： 20-50次/h. 压强梯度：洁净区高于污染区 合理组织气流和风速可调节室内温度和湿度，又可降低室内粉尘和有害气体污染，控制传染病的流行。 4、光照 工作照度150—300lx 动物照度15－20lx 明暗交替时间12/12或10/14h 照度对动物的生殖生理和行为活动有较大影响 强光长时间照射引起角膜退行性变化 5、噪声 60dB以下 音域，人1000~2000Hz,小鼠1000~5000Hz。 引起小鼠听力性痉挛。 对生殖影响较大，如豚鼠流产。 引起动物呼吸、心跳、血压、肾上腺皮质激素等生理指标变化。 6、空气洁净状况 气体污染， 氨14mg/m3 有害气体，氨、甲基硫醇、硫化氢等 颗粒污染，100级，10000级，100000级 美国宇航局标准，每立方英尺空气中直径0.5微米以上粒子的个数。 粉尘颗粒，是变应原，还是微生物的主要载体。 落下菌数，0（隔离环境），3（屏障环境），或30个/皿（普通环境） 在不饲养动物的状态下每5～10m2放置1个直径9cm的血琼脂培养皿，暴露30min培养48h的菌落数。 7、生物因素 动物社会因素和动物饲养密度 微生物 其它动物 实