激光共聚焦显微镜在新生大鼠耳蜗组织染色中应用.pdf

分析测试技术与应用 激光共聚焦显微镜在新生大鼠耳蜗组织染色中的应用 孟召祥1 王苹2 李庆智1‘ 王心蕊3杜波2 (‘吉林省人口生命科学技术研究院吉林130041) (2吉林大学第-,ts床医院耳鼻咽喉一头颈外科吉林130021) (3吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病教育部重点实验室吉林 130062) 摘要本文目的是探讨耳蜗组织免疫荧光染色及激光共聚焦显微镜技术的应用。分离新生大鼠耳蜗，培养于 胶原支持物上，采用0．25raM的顺铂作用24h，NF一200免疫荧光染色。激光共聚焦显微镜下观察顺铂对耳蜗毛细胞和 神经元的毒性作用。结果显示，顺铂对培养的耳蜗毛细胞的损伤没有频率特异性，毛细胞缺失可出现在整个基底膜； 谷氨酸盐受体抑制剂一CNQX与顺铂同时作用耳蜗基底膜的神经元损伤程度与单纯顺铂组没有明显差别。结论表 明，顺铂能够导致耳蜗毛细胞丢失和形态改变，对耳蜗神经元的损伤可能是顺铂对神经元的直接毒性。 关键词耳蜗；激光共聚焦显微镜；免疫荧光染色 中图分类号R446 CochlearCultures andObservationwiththeLaser Staining Confocal Scanning MicroscopySystem B02 Pila92，Li Xinmi3，Du MengZhaoxian91，WangQingzhil，Wang JilinLifeScienceand Research (1 Technology Institute，Jilin。130041，China) andNeck of First JilinUniversity，Jilin。130021，China) (2DepartmentofOtolaryngology—HeadSurgery，TheHospital of of (3KeyLaboratoryZoon06es，MinistryEducation，InstituteofZoono$e8，JinlinUniversity，Jilin，130062，China) AbstractThe ofthisarticleisto The ofcochlearimmunofluoreseent purpose exploreOrganization staining andlaser confocal cochleasWasisolatedandculturedon scanning microscopetechnologyapplications．The collagen culturesweretreatedwith0．25mM for24handNF一200immunofluorescent particle．Cochlear cisplatin staining Wasusedtolabel wasusedtolabelhaie 32442Wasusedtolabelnuclei． SGNs，TRITC—Phillodin cells，H