细胞工程yyd第六篇 细胞培养技术.pdfVIP

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第六章 细胞培养 一、定义:是指将动物组织或细胞分散成 单个细胞,在模拟机体内的生长环境下使 其继续生长增殖的过程。 一般此种细胞不会发生分化成为组织,培 养的目的可以收获细胞本身也可以收获细 胞产物。 培培养难度:干细胞、肿瘤细胞等易;肝、 G0 肾细胞(有G0期,但也可恢复分裂)易; GG00 终末分化细胞(例如神经细胞,永远处于 G0 G0期) GG00 二、发展的历史 1 1907 1、美国生物学家哈里森于1907年采用盖片覆盖凹窝玻璃悬滴培 11 养法将蛙胚的神经组织培养在淋巴液中,存活了几周,开创了 细胞培养。 2 1923 2、1923年,卡瑞尔发明了卡士瓶培养法,扩大了培养组织的生 22 存空间。 3 1951 3、1951年,厄尔利开发了动物细胞体外培养的培养基,动物细 33 胞培养技术开始形成。 4 70 4 70 、 年代,大规模微生物培养技术的出现,几乎代替了动物的 44 7700 细胞培养,但在生产过程中,出现了许多生物活性蛋白质只能 在动物细胞中产生,因为原核细胞缺乏蛋白质转录后修饰能 力,也不能将蛋白质产物自动分泌到细胞外。 5 80 5 80 、 年代:基因工程技术和细胞融合技术迅速发展,能把特定 55 8800 的外源基因转染到动物细胞体内,使其得到高质量的表达。 三、动物细胞生产的生物制品 包括病毒疫苗,非抗体免疫调节剂,多肽生长因 子,酶类,激素,肿瘤特异性抗原,单克隆抗体, 病毒杀虫剂等 � 四、培养细胞的生长特性 1 � 1、培养细胞的生长方式 11 � 贴附生长: � 必须贴附于支持物表面才能生长。见于各种实体 瘤细胞 � 悬浮生长: � 于悬浮状态下即可生长,不需要贴附于支持物表 面。见于各种造血系统肿瘤细胞 2 2、每代贴附生长细胞的生长过程 22 1 1 )游离期:细胞接种后在培养液中呈悬浮 状态.也 11 称悬浮期。此时细胞质回缩,胞体呈圆球形。一般维 10 4 持 分钟一 小时。 10 4 1100 44 2 )贴壁期:细胞附着于底物上,游离期 结束。细胞 2 22 1

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