内耳转基因表达实验研究.pdfVIP

· 340- 2003年 lO月第 38卷第 5期 ChinJOtorhinolaryngol,October2003,Vo138,No．5 ． 基 础 研 究 ． 内耳转基 因表达 的实验研究 于子龙 韩德 民 林晨 范尔钟 郭连生 【摘要】 目的 了解 内耳转基因表达 的可行性。方法 将人复制缺陷重组腺病毒基因 (Adenoviruses，Ad，含大肠杆菌 B一半乳糖苷酶基 因LacZ基 因，Ad5．LacZ)经豚 鼠耳蜗蜗窗接种到鼓 阶外淋 巴后 ，观察在不同时间、不 同内耳组织 中LacZ基因的表达 (X—Gal染色)及 Ad对豚 鼠声反应 (听性脑干反应)、听毛细胞 (扫描电镜)的影响。结果 Ad介导的 l_acZ基 因在 内耳组织 中的表达至 少可持续4周 ，其 中在螺旋神经节细胞表达稳定 ，Corti器 、前庭囊斑 、壶腹嵴的毛细胞等也有较强的 表达 。Ad未对豚 鼠声反应 (≤8000Hz)造成明显的损伤 ，除耳蜗底 回外 ，其余各 回未见明显的毛细 胞缺失 。结论 腺病毒载体可成功地将 LacZ基因转导致豚鼠内耳组织 中，并且未对豚鼠声反应 (低 、 中频)及听毛细胞造成明显损伤 ，这对未来的内耳基因治疗研究可能具有重要 的参考价值 。 【关键词】 腺病毒，人； 转基因； 耳蜗； 豚鼠 Experimentalstudy oftransgenicexpression in innerear YU 一long ，HAN De—min，LIN Chen， FANEr-zhong，GUOLian—sheng．DepartmentofOtorhinolaryngology，Arfai dBe TongrenHospitalof CapitalUniversityofMedicalSciences， 咖 100730，China Correspondingauthor：YUZi—long(Email：yuzilong6488@yahoo．com．cn) 【Abstract】 Objective Toevaluatehtefeasibilityoftransgenicexpressionininnerear．Methods AfterAd5．1_acZ (replication—deficientrecombinanthumna adenovirus，containing Escherichia coliB— galactosidasegene)Was injectedintotheperilymphaticfluidthroughhteroundwindowsofguineapigs，nad hteexpressionofLacZ(galactosidasestaining)indifferentcochleartissuesnadhtehearing(ABR)andhte auditoryhaircell(scnaningelectronmicroscope)wereobservedindifferenttime．Results Theexpression ofLacz mediatedbyAdinug ineapigcochleacouldlast4weeksatleast．na dhteexpressionWas moststable inspiralganglionceHs，whileitWas alsofound inhairceHsofhteorgna ofCorti，vestibularmaculas na d ampulla．Addidntdogreatharmtohtehearing(≤8000Hz)，therewerenotsignificnatlossofhteauditory hairceBsexceptthe spraelylossofouterhairceHsathte basal turn ofcoc hlea． Condusion Ad Cna successfullytrna spo rtLacZintoinnerera tissueofug ineapig．na ditdoesnotdorgeatharm tothehearing na dhteauditory hairceHsofug ineapigs，thismayhaveimportantvalueforg