源真核生物蓝氏贾第虫核分裂的初步观察.pdfVIP

维普资讯 27乡一7，77 2 ％ 7 动 物 学 研 究 1996，17 (3)：295—299 c 53一lo40／Q ISSN 0254-5053 ZoologicalResearch 源真核生物蓝氏贾第虫核分裂的初步观察 沈剑钊 李靖炎 ． 卢思奇 (首都医科大学寄生虫学教i旰 北京 100054) (··中国科学院昆明动物研究所分子与细胞进化开放研究实验室 昆 ≥ 摘要 贾第虫属于源真核生物 (Archezoa)中的双滴虫门，是 目前 的真核生 物。本工作 次对蓝氏贾第虫 (Giardlialambla)的核分裂作了初步的 电镜观察，未能在分裂 着的核 中见到纺锤体或纺锤体微管。以 01 2O g／m1浓度的秋水仙素作实验，其棱分裂也不 受阻抑。以抗微管蛋 白的多抗作免疫荧光检查，也未见分裂着的棱 中有撤管蛋白。这似乎意味 着其核分裂方式乃是前有丝分裂性质的 对此进行了讨论。 关键词 贾第虫，堑墨纺锤体，微管蛋白，秋水 随着原生生物细胞生物学与分子生物学研究的发展 80年代从原生生枥中 个特 别原始的大类群一一源真核生物 (Arehezoa，希腊 文字头 arche为 “开端的”之意) (Cavalier—Smith，1987，1989)，它们没有线粒体及典型的高尔基 氏器，核糖体也仍然跟原 核生物的一样是 70S型。从 rRNA的分子进化 (Sogin，1989；李靖炎，1992)和细胞核 的特性看 (李靖炎，1996)，双滴虫类又是源真核生物中最原始的。此点在研究双清虫类 的核分裂、认识有丝分裂的起源和演化上将是极其重要的。但是在文献上，有关双滴虫类 的核分裂研究，过去几乎都是在光学显微镜下完成的。由于双滴虫类的细胞核微小，其研 究的精确性是可疑的。 我们以纯培养的蓝 氏贾第虫的滋养体作为双滴虫类的代表，对其核分裂过程进行了初 步的常规电镜检查和免疫荧光显微镜检查。蓝氏贾第虫有两个细胞核，每个核的体积尚不 足 O．5 m 。在这种情况下，不作电镜观察，而只凭光学显微镜的检验，显然是弄不清 问 题的。因此，必须进行 电镜观察。此外，我们还配合作了其他的检验。 1 材料与方法 蓝 氏贾第虫 SICH ／89／BTMRI(C2)株，按前人介绍的方法 (祝虹等，1992)将保 存于液氨内的贾第虫 (Giardialamblia)纯培养滋养体复苏，用改 良的 TY 卜S一33培养基 连续传代。不采用 “冰浴法”收集虫体，而采用常温下用力振荡培养管，使虫体从管壁脱 本工作得到国家 自然科学基金的资助 本文通讯作者 奉文 1995年 7片7日收到，同午 11月 28日悟回 维普资讯 动 物 学 研 究 17卷 落，再离心收集虫体。 电镜观察：按常规用戊二醛与锇酸作双固定，Epon812包埋，超薄切片，醋酸铀与 柠檬酸铅双染。 不同梯度浓度的秋水仙素对贾第虫核分裂的影响观察 贾第虫组：取 7小管 (4m1)处于对数生长期的贾第虫，加入 已过滤除菌的秋水仙 素，使培养基中的秋水仙素终浓度分别为 0、0．1、05、l、5、l0和 2O g／ml，置 37℃ 恒温箱 中培养 l2一 l3h，取出观察其生长情况。观察后更换预热至 37℃的新鲜培养基， 继续培养，每半小时观察一次生长情况，共观察 2—3h。 对照组：．取两瓶传代 后处于对数生长期的 Hela细胞，一瓶不