猪脑神经节苷脂的测定及其分析.pdfVIP

维普资讯 ， f ’ 争；一3 生物化学与生物物理进展 Prog．Biochem．Biophys． · 353 · 一 … ～ ～ 一 ．； ：技 术 与 方 法 ； ’ 一 · 一 ． 一 ～ ． 一 · 一 _ 猪脑神经节苷脂的测定及其分析 —— 罪曲萑军面至与王泽生佟大山 史小苓 化学教研室 北京100054)Q s．8 摘要 神经节苷脂是神经酰胺寡糖苷类物质．在脊椎动物 的中枢神经系统中含量十分丰富．猪脑神经 节苷脂经分离、纯化后的成分和含量的分析显示 ，猪脑神经节苷脂的含量 占猪脑组织重量的0．0894 (W ／W)，是猪脑总脂含量 的0．39 (w ／w)．主要成分是 GM1，GD3，GDla，GDlb和 GTlb，其 中 GM 1和 GDIa 关键词 神经 神经节苷脂 称为总脂或粗提 Gls． 和唾液酸 (sialic 1．3 分离、纯化 调整离心液相色谱仪转速为 (glycosylceramide)类物质 “]，是正常膜结构的 400r／min．硅 胶G注 入 色谱 分析盘 ．用 氯 成分 ，具有多种生物学功能 ]．中枢神经细胞 仿一甲醇 ·水混合液 (7：3O．5，V／V)淋洗 ，直至 特别 是脑细胞 中含量丰富 ，对神经细胞的发 淋洗液为无色为止．将预先溶于少量氯仿 ·甲 育 ，再生和修补起重要作用 目前在 国际市 醇混台液 (7：1，V／v，下同)的粗提 Gls加到 场上只有牛脑Gls制剂．大多数的实验室也采用 色谱仪分析盘 ．先用氯仿一甲醇一水混 台液 牛脑神经节苷脂作神经生物化学、药理学和肿 (7：3：O．5)淋洗 5个体积 ，再换用氯仿一甲醇一水 瘤学分析 ．为 了将 Gls用于我国神经组织 混台液 (6：4：1)洗脱 ，分部收集，每管lOOm1． 损伤和修复的临床实践 ，寻找适合国情的Gls 合并显色反应阳性各管 ，减压蒸干，放4C保 的来源 ，我们测定了猪脑Gls的含量和成分． 存备测． 1．4 脂结合唾液酸 (LBsA)含量的测定 利 1 材料和方法 用 Svennerholm 的方法 ，取5—35g标准 SA 1．1 材料 新鲜猪脑 (丰台肉联厂提供)；离 的溶液放入具塞离心管 内，加入2ml水和2ml 心液相色谱仪 (dr京新技术应用研究所制造)； 间苯二酚 ·盐酸试剂．沸水浴中放置15min，流 CS一900扫描光密度计 ；uV一120·2紫外可见光 水冷却后 ，再加入5ml新蒸戊醇．剧烈震荡后， 于冰 浴 中静置 lOmin，取 上层 戊 醇相 测 定 分光光度计 (日本岛津公司制造)；硅胶高效薄 580nm波长的吸光值并绘制标准 曲线．依同样 层层析板 (浙江黄岩红虞化工厂产品)；硅胶 的方法 ，检测 由猪脑抽提的粗提 GIs和经离心 G一60 (Merck公司产品)；Gls(Sigma公司产