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蛙反射弧与蛙心起搏点观察结合实验改进 【摘要】目的：进一步研究蛙反射弧与蛙心起搏点观察结合实验改进的方法，以寻找一种更新的、成功率高的实验方法在学生实验操作中开展。方法：用脊蛙组180例，保留蛙小脑组200例做蛙反射弧分析与蛙心起搏点观察。结果：脊蛙组与保留蛙小脑组做对比，保留小脑组能精确完成反射动作而且动作较脊蛙组迅速。结论：在做蛙反射弧分析实验中，保留鼓膜及以内的部分脑组织：1.减少对蛙造成的出血损伤。2.延长实验用蛙的存活时间以便进行后续实验观察结果。 【关键词】反射弧 脊休克 神经调节是体内最为普遍的一种调节方式，它是通过神经系统各种活动实现的1。反射是神经系统最基本的调节方式。反射活动的结构基础是反射弧。反射弧由五个基本成分组成，即感受器、传入神经、神经中枢、传出神经和效应器。中枢经过分析和整合作用后，发出神经冲动沿传出神经纤维到达肢体有关肌肉，使屈肌收缩产生逃避反应。只有在保证反射弧各部分结构和功能的完整性的条件下，反射活动才能完成。反射弧任何一个部分的结构或功能受到破坏，反射活动都会减弱或消失2。反射运动是最基本、最简单的运动。由特定感觉刺激引起，有固定的运动轨迹，不受意识控制。而随意运动是在大脑破坏后，小脑把获得的外周反馈信息直接作用于脊髓前脚运动神经元的活动3。 本次实验研究对象是以2014年3月至2016年3月期间，实验牛蛙为研究对象，选取380例牛蛙标本，了解小脑对神经反射的影响，报道如下。 1.材料与方法 1.1标本来源 2014年3月至2016年3月我校各专业学生实验蛙的反射弧分析所用实验动物。 1.2器材和药品 蛙类手术器械1套，止血钳1把，铁架台，大烧杯，玻璃平皿，滤纸片，药用干棉球，棉线,2%H2SO4溶液,生理盐水,医用大纱布,蛙板。 1.3研究方法 1材料准备 可提前采集、养殖、贮备牛蛙等实验材料，实验前置30℃恒温水中游动20～30min以提高牛蛙的活力。 2制备实验用蛙 先用纱布包住蛙的躯干和四肢。用解剖剪的一面插进蛙的上下颌之间，齐鼓膜后缘将头部剪去。仅保留下颌。把延髓剪去，去掉蛙的全部脑组织。以蛙腹面朝上放解剖盘不能翻身失去紧张力为宜。另一组则齐牛蛙双眼后剪去，去除大脑，保留小脑组织。全部实验均是在室温24℃～25℃进行的。在牛蛙的下颌做一个孔，穿线挂在铁架台上。小脑组的止血时间较脊蛙组用时稍短，出血量远少于脊蛙组。能较早开始试验，为实验在时间上创造更充裕的条件，方便学生操作。 3 实验过程 a．把0.5％H2SO4溶液改成2％H2SO4溶液，刺激强度加大，同侧屈腿反射和对侧伸肌反射效果更明显。每次刺激观察完须迅速用清水冲洗干净并用纱布擦拭。b．小滤纸片先不要浸在酸中，对折两下迅速醮酸。纸片有湿有干，放在蛙的胸部或腹部皮肤上，让蛙更容易扒掉。观察结果：保留小脑组蛙前肢脚趾张开抓掉纸片，且后肢屈腿协助上肢。脊蛙组出现搔扒反射慢，定位不如保留小脑组精确。c．观察屈腿反应。用培养皿装少量2％H2SO4溶液刺激牛蛙脚趾皮肤停顿2秒左右移开，观察屈腿反射和对侧的伸腿反射。小脑组脚趾张开抬腿有力且上肢同时向外刨呈逃跑的游泳状。脊蛙组反应较小脑组慢，刺激时间也较保留小脑组长，屈腿反射现象弱且肌肉松弛无明显可见肌肉运动。每做完一次要及时用清水冲洗硫酸，但如果冲洗后马上就贴硫酸滤纸片，往往很难出现搔扒反射。原因是冲洗后蛙皮肤表面有残留的清水，若此时立即贴硫酸滤纸片，硫酸浓度降低，刺激强度减弱达不到阈值。另外，刚反射后，蛙的脊髓也有一个稍短的绝对不应期，所以每次反射应间隔2^-3m in 为宜。4与屈腿反射相似，实验现象比较，小脑组双上肢手趾张开，能协作拔掉滤纸片。动作快且精准。脊蛙组无明显可见肌肉收缩，双上肢动作极不协调，反应迟钝，更无法精准触及腹部皮肤。但一系列抓扒后仍可以拔掉滤纸片，整个肢体晃动大，若不破坏下肢反射弧也可协助上肢，且动作混乱，肢体完全失去平衡，在铁架台上晃动弧度大，不便于学生完成实验。 1.4结果的计算 根据屈腿、搔扒反射两组的实验情况，相互结合进行研究判断。 1.5统计学处理 资料用（±s）表示检验，P 0.05有意义。结果（见附表） 附表：（±s） 注：*P 0.05，**P 0.01。 参考文献： 1.2.白波,高明灿主编2011.生理学（第六版），人民卫生出版社。 3．孙庆伟,李良东,蒋绍祖主编.2014.生理学(第一版)，北京:中国医药科技出版社，181 一190 4．姚建奇，脊蛙反射实验易出现的问题及解决方法，生物学通报2001年第36卷第 6期 5．范心兴，用脊蛙反射实验分析反射弧的结构，实验教学与仪器.2001年第9期。 6．王庭槐主编.2004.生理学实验教程(第一版)，北京:北京大学医学出版社，197 一198 7．小脑认知功能的临床研究进展 郭旭