热液区管状蠕虫几丁质结合蛋白的克隆表达及功能鉴定.pdfVIP

31 1 台 湾 海 峡 Vol. 31，No. 1 第 卷 第 期 2012 2 JOURNAL OF OCEANOGRAPHY IN TAIWAN STRAIT Feb． ，2012 年 月 热液区管状蠕虫几丁质结合蛋白的 克隆表达及功能鉴定 ， 闫鑫富 阮灵伟 ( 、 ， 361005) 国家海洋局第三海洋研究所 海洋生物遗传资源重点实验室 福建厦门 : PCR ， pIZ-FLAG 摘要 本文应用 技术对四种管状蠕虫几丁质结合蛋白进行了扩增 进而连接到 构建 了重组表达载体， ． 并在昆虫细胞中实现了几丁质结合蛋白的异源重组表达 我们对几丁质结合蛋白 ， -chitin ， 的功能进行了初步研究 亲和活性实验结果表明这四种几丁质结合蛋白对α 具有亲和活性 ， -chitin -chitin ， ． 并且可以辅助几丁质酶 对降解α 和β 均有不同程度的促进作用 且作用效果明显 结 ， ， ， 果表明 这四种几丁质结合蛋白均为α 型 且可以促进几丁质酶的活性 对降解几丁质多糖具有巨 大的应用潜力和应用价值． : ; ; ; ; ; 关键词 海洋生物学 热液口 管状蠕虫 几丁质结合蛋白 克隆 表达 DOI :10 ． 3969 / J． ISSN． 1000-8160 ． 2012 ． 01． 005 中图分类号:P735 文献标识码:A 文章编号:1000-8160 (2012)01-0034-05 深海热液区以其独特的极端环境孕育着特殊的 质粒 pIZ-FLAG 由本实验室改造自 pIZ / V5-His ; ， ． pMD18-T Vector 、Primerstar HS DNA Polymerase 、T4 生物群落 是值得研究与开发的重要生物资源宝库 ［1-2］ DNA Ligase 、 TaKaRa ; 热液口管状蠕虫是热液生命的典型代表 ，也是 限制性内切酶均为 公司产品 目前阐述热液生命形式较为彻底的一种生物． 蠕虫 抗生素Zeocin 、cellfectin 转染试剂为Invitrogen 公司 作为这里的生命基础， 产品;SFX -Insect 无血清培养基购自Hyclone 公司; 经过长期的生物进化形成了 、 、 BBI ;DNA