病毒的分类及微物检验.ppt

核酸的性质与结构 病毒大小与形态 衣壳对称性和壳粒数目 有无包膜 对理化因素的敏感性 抗原性 生物学特性（繁殖方式、宿主范围、传播途径和致病性） 二、病毒分类系统和命名 （一）病毒分类一般系统 病毒分类系统将病毒分类为 科(families)、 属(genera)、种(species)等三级，或科、亚科、 属、种等四级。 根据病毒体的形态、基因结构和复制模式 等特征将病毒分为科和亚科； 在科或亚科中又根据理化特性和血清学特 性等分病毒属，属名后缀为—virus，属下分为 不同的病毒种。 一、标本的采集、运送和处理 1. 应在感染早期（发病1～2天内）采集。 2. 必须无菌操作，对用于病毒分离培养的污染标本用 高浓度抗生素处理过夜，必要时需加抗真菌药物等 3. 及时送检，送检的组织等可放入含有抗生素的50% 甘油缓冲盐水或二甲基亚砜中低温冷藏。 4. 血清学检查的标本，尤其检测抗病原体的IgG型抗 体，应分别在发病初期和恢复期采集双份血清，只 有当恢复期血清抗体效价比初期升高4倍或以上， 才具有确诊意义。 ?? （三）早期抗体检测 1．IgM型特异抗体检测 检测病毒感染机体产生的特异性IgM，如孕妇羊水中查到IgM型特异抗体可早期诊断某些病毒引起的胎儿先天性感染；IgM抗体测定有助于早期诊断，但感染机体产生IgM抗体有明显个体差异。 2．免疫印迹试验（Western blot, WB） 某些病毒感染的诊断需持慎重认真的作法。如AIDS和成人白血病等，在初筛试验阳性后，尚需用WB法进行确认试验。 （1）斑点杂交（dot blot hybridization）： （2）原位杂交（in site hybridization）： （3）DNA印迹（southern blot）和RNA印迹 （northern blot）杂交技术 3．聚合酶链反应（PCR） 4．基因芯片技术（gene chip） 5．基因测序 包括病毒全基因测序和特征性基因 片段的测序。 * 病毒的分类 一、 分类原则 分类 可将病毒分为科、亚科和属 常用核酸类型分类 1 DNA virus (DNA病毒中有9科 ) 2 RNA virus ( ssRNA－ 7 科. ssRNA＋ 7 科. dsRNA 2科 ) 3 反转录病毒 (DNA和RNA反转录病毒中有2科) 依传播方式和感染部位分类 1 虫媒病毒 2 肠道病毒 3 呼吸道病毒 4 肝炎病毒 5 性传播病毒 （二）非寻常病毒的分类 1 卫星病毒（satellites） 2 类病毒（viroids） 3 朊粒（prion） 第三节?? 病毒学诊断 自身免疫病和肿瘤密切相关。病毒性疾病在人类疾病中占有十分重要的地位。 由于病毒感染的防治原则不同于细菌等其他微生物，尽早判定病人感染或某传染病的流行是由病毒所致，是医生和微生物学实验室的责任和任务。 病毒的分离与鉴定当然是病毒病原学诊断的金标准，但因病毒是严格细胞内寄生，病毒分离必须有活的细胞支持，故病毒的分离鉴定较困难。 分离培养鉴定 (污染标本用抗生素处理过夜) 快速诊断 鸡胚 红细胞凝集试验 红细胞凝集抑制试验 细胞培养 CPE 电镜检测 中和试验 TCID50 pfu测定 MOI测定 动物接种 观察发病情况 中和试验 免疫学检测 ID50测定 LD50测定 形态学 电镜观察 病毒颗粒 （大小、 形态） 光学显微镜观察 包涵体 抗原 检测 ELISA IF RIA WB 核酸检测 核酸电泳 核酸杂交 PCR 基因芯片 基因测序 抗体 检测 ELISA RIA IF WB 病毒成分检测 标本采集 ? ? ? ?