01组织学序言1.ppt

第1章; 组织学（histology） 研究机体微细结构及其相关功能的科学 研究水平：组织、细胞、亚细胞和分子 （例：心脏）; 组织（tissue） 构成：细胞群和细胞外基质 细胞：机体结构和功能的基本单位，成人约有1015 个、200 余种 细胞外基质：由细胞分泌形成 类型：上皮组织、结缔组织、肌组织和神经组织 组织以不同的种类、数量和方式组合形成器官；若干功能相关的器官构成系统; 促进了生理学的进步 是病理学的基础 促进人类对自身的深入了解;简称光镜（light microscope，LM） 16 世纪末荷兰人发明→1665 年胡克命名“细胞” →马尔比基观察了脾、肺、肾、表皮；列文虎克发现红细胞、精子、肌纤维；格拉夫发现卵泡→1801 年比沙提出“组织”概念; 提出：施万、施莱登（1838、1839） 内容：细胞是一切动、植物体的基本结构和功能单位；细胞内进行着复杂的化学反应；新细胞由原有细胞产生;简称电镜（electron microscope, EM） 发明：1932 年 卢斯卡、科诺尔，使分辨率提高到 0.2nm 超薄切片术（50－80nm） 超微结构（ultrastructure）：即细胞膜、细胞器、染色体等亚细胞结构; 新仪器、新技术的发明和应用 免疫组织化学技术、原位杂交技术将组织学引入分子水平 组织工程学技术拓展了组织学的临床应用前景;审视角度 组织水平：层次顺序、特征性结构和细胞 细胞水平：主要细胞的分布、结构特点（含重要细胞的超微结构）及功能 形态和结构相统一 结构是功能的基础，功能是结构的必然表现 培养观察能力：重视实习课和图像观察 培养空间思维能力：将二维图形还原为三维构像;石蜡切片术（paraffin sectioning）：取材、固定、脱水、包埋、切片（5 ～ 10 μm 厚）、染色 苏木精- 伊红染色法（hematoxylin-eosin staining， HE染色法）：苏木精为碱性染料，使染色质和核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，使胞质和细胞外基质着红色 嗜酸性（acidophilia);嗜碱性(basophilia) 特殊染色;透射电镜术（transmission electron microscopy, TEM） 用于观察组织细胞的超微结构 戊二醛、锇酸双重固定→树脂包埋→超薄切片（50 －80nm 厚）→电子染色（醋酸铀、柠檬酸铅） 根据电子束在不同结构上被散射程度的差异表现为电子密度高（黑或深灰色）和电子密度低（浅灰色）; 扫描电镜术（scanning electron microscopy, SEM） 用于观察组织细胞表面结构，具有真实的立体感，无需制备切片;组织化学术（histochemistry）为应用化学、物理、生物化学、免疫学或分子生物学的原理和技术，与组织学技术结合而产生，在组织切片显示某种物质的存在和分布状态 分类： 一般组织化学术 免疫组织化学术 原位杂交术; 一般组织化学术：组织中的某种结构成分与所加试剂发生化学反应、并呈现某种颜色，在显微镜下可观察到 糖类： PAS（过碘酸希夫）反应，显示多糖和糖蛋白，呈紫红色 糖 多醛 品红硫酸复合物 （希夫试剂，无色）;免疫组织化学（immunohistochemistry） 根据抗原、抗体特异性结合原理，检测组织切片中的肽和蛋白质 用标记的抗体与组织中的抗原结合，标记物可于显微镜下观察。标记物有荧光素（荧光显微镜观察）、辣根过氧化物酶（光镜或电镜观察）、胶体金（多用于电镜观察）;原位杂交术（in situ hybridization） 即核酸分子杂交组织化学术，检测基因（DNA片段）的有无、基因的表达活性（mRNA） 原理：用带标记物的已知碱基顺序的核酸探针与细胞内待测核酸按碱基配对原则进行特异性原位结合（杂交），并通过对标记物的显示而获知待测核酸的有无及相对量 常用标记物有放射性核素和地高辛; 放射自显影术（autoradiography） 概念：通过活细胞对某种放射性物质的特异性摄入，以显示该物质在组织和细胞内的分布、含量和代谢过程，以反映细胞的功能状态 应用举例 ①用3H标记的胸腺嘧啶核苷研究DNA合成和细胞增殖状态 ②用125I 观察甲状腺滤泡内碘化部位;图像分析术（image analysis）又称形态计量术（morphometry）：应用数学和统计学原理对组织切片提供的平面图像进行分析，从而获得立体的组织细胞内有形成分的数量、体积、表面积等参数，从量的角度显示结构与功能的关系 体视学（stereology）：