植物病理学实验实验七、侵染性病害侵染过程的观察.ppt

实验七侵染性病害侵染过程的观察 一、实验目的 1.学习侵染性病害病原接种方法。 2.了解植物病害的侵染过程。 二、实验材料 1.温室培养好的3-4叶期烟草，TMV毒源（感染TMV的烟叶），800目金刚砂，研钵，洗瓶等。 2.温室培养好的3-4叶期铭贤169小麦苗；吐温-20；小麦条锈病菌毒性小种；喷壶等。 三、实验内容 1.教师示范病毒病接种。以烟草花叶病毒病为例，采用汁液摩擦接种法接种。放于温室培养发病，定期进行观察病害进展情况，了解病毒病害的侵染过程。 2.学生三个人一个小组进行真菌病害接种。以小麦条锈病为例，采用喷雾接种法接种，定期观察接种后小麦苗的生长情况，并调查小麦条锈病的发生情况，了解真菌病害的侵染过程，练习真菌病害人工接种方法。 接种方法 种传：拌种、浸种； 土传：菌土、浸根； 气传：喷雾、涂抹、注射、针刺、喷粉、扫接； 虫传：媒介虫传； 嫁接传：菟丝子、嫁接。 侵染性病害侵染过程 侵染过程一般包括: 接触期 侵入期 潜育期 发病期 烟草花叶病毒病示范接种 1.用磷酸肥皂将所有器具及手洗净； 2.在研钵中加入少量pH7.0的0.1M的磷酸缓冲液，用研钵将烟草花叶病毒源研成匀浆； 3.在健康叶片正面撒上依稀可见的800目金刚砂； 4.用洗净的手指蘸少许毒源匀浆，在健康的烟草叶片上摩擦三次（不要用力过大）。同时用清水摩擦作对照，注意应先作对照摩擦试验，后做病毒汁液摩擦接种，以免对照感染TMV； 4.用洗瓶冲掉叶面上残留的汁液； 5.将接种后的烟草苗放于温室中进行培养观察。 小麦条锈病菌喷雾接种 1.取少量新鲜的小麦条锈病菌夏孢子，放于小培养皿中，加少量清水，滴入1-2滴吐温－20，用玻棒轻轻搅拌，直至浆糊状，用清水洗入喷壶，摇匀，配成孢子悬浮液； 2.用喷壶将配好的孢子悬浮液在培养好的小麦苗上进行喷雾接种，喷雾要均匀一致。同时用清水作为对照； 3.接种后，将小麦苗移入大铁筒内，摆放整齐，用一块表面喷清水的塑料薄膜覆盖铁筒，密封保湿，保湿12-15小时后揭去薄膜，置于温室内培养，定期观察发病情况。 小麦条锈病菌接种 小麦条锈病病原物为条形柄锈菌（Puccimia striiformis），担子菌门柄锈菌属。 条锈菌菌种繁殖的主要步骤 作业 1.写出烟草花叶病毒病接种的简要步骤，并说明其原理，记载并分析结果。 2.写出小麦条锈病菌接种的简要步骤，调查小麦条锈病菌的潜育期、寄主反应型、病害普遍率、严重度，计算发病率和病情指数，并将结果记入下表。 * * 2.撒粉法 3.涂抹法 种苗 步骤 接种 潜育 收菌 温度 光照 试管套 病叶 主要因素 有活性的新鲜孢子 菌种 滑石粉 量比：1：3 干燥保存 防止交叉 叉污染 1.喷雾法 苗龄达到 1叶1心叶 接种 潜育期 约8天后开始现斑 小麦条锈病接种试验结果