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74 食品与药品 Food and Drug 2009 年第11 卷第05 期 ·知识介绍 · 绿色荧光蛋白 黄思玲 （山东福瑞达生物化工有限公司，山东 济南 2 50101 ） 2008 10月8 日，瑞典皇家科学院决定将2008 国科学家约翰森的研究。1962 ，下村修与约翰森 年度诺贝尔化学奖共同授予Osamu Sh imomura （下 在纯化水母素的研究过程中，有一天下修村下班前 村修）、Mar tin Ch alfie （马丁·沙尔菲）和Roger 将水母发光蛋白的提取产物倒进 池里，出门前关 Y ．T si en （钱永健），以表彰他们在绿色荧光蛋白 灯后发现 池闪闪发光。后来发现这种蛋白质副产 （gr een flu or escen t pr otein ，GFP ）发现和研究方 物在阳光下呈绿色，钨丝下呈黄色，紫外光下呈强 面所做的贡献，这也使得在生物学研究领域早已普 绿色。他们研究了其发光特性，1974 年得到这种蛋 遍使用的荧光蛋白走进了普通大众的视野。 白质，当时称为绿色蛋白，后改称GFP 。 下村修的主要贡献是首次从多管发光水母中分离 下修村只是对生物发光好奇，在发现GFP 后的 出GFP ，并发现其在紫外灯照射下发出绿光。沙尔 30 余 里，下修村及其他科学家并没有发现GFP 的 菲证明了GFP在各种生物现象中作为发光遗传标签的 应用前景。1994 ，沙尔菲将GFP 基因克隆到表达 价值。钱永健阐明了GFP 的发光机制，并开发了具 载体大肠杆菌和线虫细胞中，在紫外线或蓝光的激 有其他颜色荧光的蛋白质，让研究者能够给予不同 发下均可产生绿色荧光。这是GFP 作为荧光指示剂 的蛋白质和细胞不同的颜色，以便在同一时间跟踪 的真正突破。之后，很多研究者将这种蛋白质引入 [1, 2] 自己的科研系统，产生了荧光猪、荧光鼠、荧光 几个不同的生物过程 。 GFP是20 世纪90 代中期发展起来的一种全新 鱼、荧光兔等。但这种蛋白质稳定性差。同年，钱 的报告分子。同以往常用的报告基因，如 - 半乳 永健开始了GFP 的改造，改进了GFP 的发光强度、 糖甘酶基因 （lacZ g ene ）、氯霉素乙酰转移酶基因 颜色（发明变种，多种不同颜色），发明了更多应 （cat g e n e ）、荧光素酶基因 （luc g e n e ）以及其 用方法，并阐明了发光机制，取得了重大突破，显 他抗生素基因相比，GFP 不需要任何外源性底物和 著提高了GFP 的光谱性质、荧光强度和光稳定性。 辅助因子，无毒、稳定、无污 ，而且可以在紫 目前世界上使用的荧光蛋白大多是钱永健实验室改造 外线或蓝光激发下直接观察。GFP 作为一种新型标 后的变种，有的荧光更强，有的呈黄色、蓝色，有 记物，目前已被广泛应用于动物学、植物学、生物 的可激活、可变色。 [ 3] 现在，利用DNA 技术，可以将GFP 同感兴趣 学、药学等领域的研究中 。 1 GFP 的发展历程 但看不到的蛋白质连接起来。通过发光标记，可以 萤火虫发出荧光，是由荧光酶催化底物分子荧 看到被标记蛋白质的移动、位置和相互作用。还可 光素，发生化学反应后产生荧光。发现蛋白质自身 以在GFP 的帮助下，追踪各种细胞，如神经细胞在 发光无需任何底物这一现象，始于下村修和已故美 阿尔茨海默病(A lzh eim er ’s disea se) 患者体内的损 收稿日期：2009-03-03 作者简介：黄思玲 （198 1-），女，山东临沂人，硕士，从事糖胺聚