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细胞糖胺多糖(GAG)总含量二甲基亚甲基蓝(DMMB)比
细胞糖胺多糖(GAG)总含量二甲基亚甲基蓝(DMMB)比色法定量检测
试剂盒产品说明书(中文版)
主要用途
细胞糖胺多糖(GAG)总含量二甲基亚甲基蓝(DMMB)比色法定量检测试剂是一种旨在通过染料色,由分光光度仪比色分析,定量检测的权威而经典的技术方法。该技术精心、成功实验证明的。适用于各种检测产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,。
技术背景
产品内容
(Reagent A) 毫升
(Reagent B) 升液(Reagent ) 毫升
液(Reagent ) 液(Reagent ) 升产品说明书 1份保存方式
保存液(Reagent )在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里液(Reagent )避免光照有效保证6月
用户自备
细胞刮分光光度仪:用于实验步骤
准备好25cm2细胞培养瓶或60mm细胞培养皿的待测培养细胞(1至5 X 106细胞)
小心加入毫升 清理液(Reagent A),覆盖生长表面
小心抽去清理液
使用细胞刮脱棒轻柔刮脱细胞(注意:可以使用胰酶消化)
加入毫升 清理液(Reagent A),混匀细胞
移入到预冷的15毫升锥形离心管(注意:悬浮细胞从这一步骤开始)
放进4℃台式离心机离心5分钟,速度为300g
小心抽去上清液
加入升液(Reagent B)放进一个15毫升离心管
强力涡旋震荡1分钟,充分混匀
放进56℃恒温水槽孵育16小时
放进90℃恒温水槽孵育10分钟
放进微型台式离心机离心10分钟,速度为16000g(或13000RPM,例如eppendorf 5415)
小心移取上清液到新的1.5毫升离心管
置于冰槽里备用
二、标准样品配制
准备好5个1.5毫升离心管,标记为1至5号管
分别加入微升液(Reagent )到至5号管
移取微升 标准液(Reagent )到1号管
小心移取微升1号管的 标准液(Reagent )到2号管,混匀
小心移取微升2号管稀释的 标准液(Reagent )到3号管,混匀
小心移取微升3号管稀释的 标准液(Reagent )到4号管,混匀
将1至5号管放进冰槽里备用;标准管浓度见下表
管号 液(Reagent ) 标准液(Reagent ) 标准1 xx微升 微升 2 xx微升 微升1号管 3 xx微升 微升2号管 4 xx微升 微升3号管 5 xx微升 0 0 标准曲线测定
微升上述配制的 标准液(Reagent )
重复实验步骤1至四次
构建标准曲线:纵座标(Y轴)为吸光读数;横座标(X轴)为标准()
样品测定
加入微升上述的根据上述标准曲线含量(微克)注意事项
本产品为次操作
操作时,须戴手套
孵育时,避免光照
本公司提供系列
质量标准
本产品经鉴定性能稳定
本产品经鉴定
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