血液微量基因组DNA提取PCR试剂盒.PDFVIP

血液微量基因组DNA 提取PCR 试剂盒 Cat.No.: B0601 Size:50 次 描述：海基血液微量基因组 DNA 提取PCR 试剂盒是经研 应用 究血液 DNA 提取方法和血液化学组分特点，从而开发出可 ♦ 快速诊断及检测 快速提取全血或冻存血DNA 的试剂，并可直接用于PCR 扩 ♦ DNA 测序和克隆 增的系统。该试剂盒包含血液快速提取试剂和专用于血液扩 增的PCR Mix。(1)其中快速提取试剂可在25min 内一步完 储存 成96 样品的病毒灭活和DNA 制备工作，无需离心、洗涤、 若短期使用请置于4 ℃可放置3 个月；若长期保存请置于 洗脱等复杂的操作步骤，操作简单便捷、并减少污染的风险。 -20℃，避免反复冻融，可保存一年。 (2)2×HS Blood PCR Mix(with Dye)是经研究血液化学组分 特点，从而开发出可耐受血液中大量杂质的 Blood DNA 聚 操作方法 合酶和反应Buffer 系统。该聚合酶为热启动酶，仅通过95°C 1. 取50 μl Blood-A Buffer 置于200 μl 的EP 管中。 加热10min 后才能完全恢复活性，从而启动PCR 扩增，提 2. 取样：吸取新鲜抗凝全血或冻存血液20 μl 至上述EP 管 高 PCR 扩增的特异性，降低引物二聚体、非特异性条带的 中，短暂漩涡混匀。 扩增、提高特异性PCR 产物的产量。使用该PCR 扩增混合 3. 将加有样品和 Blood-A Buffer 的EP 管置于 PCR 仪上 物可方便的直接在反应体系中加入制备的血液 DNA 样品粗 进行以下程序 提物（或者新鲜的全血样品）进行 PCR 反应。该制品中已 70°C 15min 经含有溴酚蓝染料，PCR 扩增完毕后可直接点样于琼脂糖凝 99°C 10min 胶，无需再加入DNA Loading Buffer。该制品特别适用于临 4. 加热结束后，加入 10 μl 的Blood-B Buffer，然后用移 床检测试验和高通量血液样品的PCR 检测。 液器Tip 吹吸混匀，切勿剧烈振荡。 5. 取步骤4 所得溶液作为基因组模板，应用2×Blood PCR 组分 Mix 进行PCR，反应体系为 组分 数量 2×HS Blood PCR Mix (with Dye) 25 μl Blood-A Buffer 1.25 ml x 2 Forward primer (20 μM) 1 μl Blood-B Buffer 0.5 ml Reverse primer (20 μM) 1 μl 2×HS Blood PCR Mix (with Dye) 1.25 ml 上述模板 1-5 μl ddH2O Up to 50 μl 6. PCR 扩增循环参数 主要特征 循环数 温度 时间 ♦ 操作简单：应用该试剂盒无需离心、酚抽提等复杂步骤