RhoCMMP9的过表达促进胃癌的浸润转移.docVIP

RhoC、MMP-9的过表达促进胃癌的浸润转移 　　作者：孙玉清,刘秀哲,刘,岩,朱艳丽　　作者单位：佳木斯大学，黑龙江 佳木斯 　　【关键词】 胃癌;RhoC;MMP-9;浸润转移;免疫组化 　　胃癌是人类最常见的恶性肿瘤之一，我国卫生部组织的1990～1992年全国第二次死因调查中，胃癌的粗死亡率为25.2/10万，占所有因癌症死亡人数的23.2%。手术为现在公认的最有效的治疗手段，但术后5年生存率仅为55%左右，众多研究表明，肿瘤的侵袭和转移是胃癌恶性特征和标志，也是导致胃癌患者治疗失败的主要原因及治愈率得不到提高的主要影响因素。研究表明，侵袭和转移由肿瘤细胞的多种生物学行为所决定，而肿瘤细胞的运动能力及对细胞外基质的降解能力是两个重要方面。RhoC为Ras同源类似物C(Ras homology C)，它参与了肿瘤发生发展的几乎每个环节，包括调节细胞骨架和细胞周期、改变细胞黏附和细胞运动、影响细胞转化、调节细胞外基质的降解等生物学行为[1～4]。基质金属蛋白酶MMP-9是一种蛋白水解酶，其主要功能是降解破坏细胞外基质成分[5]，在肿瘤浸润转移中起重要作用。二者在胃癌组织中的表达变化与胃癌细胞增殖能力及浸润转移的关系尚少见报道。本文采用S-P免疫组化技术，观察62例原发性胃癌中RhoC和MMP-9表达变化，探讨二者在胃癌浸润、淋巴结转移中的作用及相关性。 　　1 材料与方法 　　1.1 研究对象 　　选取佳木斯大学附属第一医院1997～2007年间手术切除且资料完整的原发性胃癌54例。所有患者术前未经放疗和化疗。其中男30例，女24例;年龄26～83岁，平均54岁;肿瘤大小：≤5cm34例，5cm20例;肿瘤部位：上段及中段21例，下段33例;肿瘤分化：高、中分化41例，低分化13例;侵及浆膜及浆膜以外者19例，未及浆膜者35例; 有淋巴结转移23例，未见淋巴结转移31例。 　　1.2 方法 　　新鲜标本常规福尔马林固定，24h内取材，石蜡包埋，连续4Μm厚度切片，HE染色。免疫组化染色：采用链酶菌素-生物素(S-P)免疫组化技术，RhoC和MMP-9单克隆抗体(即用型)及S-P免疫组化试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司，操作严格按说明书进行。用已知阳性片作阳性对照，同时用PBS替代第一抗体作阴性对照。 　　1.3 结果判断 　　两位病理医师独立观察每张切片10个具有代表性的高倍视野。 RhoC和MMP-9阳性判断标准：阳性染色者在细胞膜或(和)浆有棕黄色颗粒沉着。根据肿瘤细胞膜或浆的染色程度以及染色细胞百分率进行分析评分：无染色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。着色细胞占计数细胞百分率0～10%为0分，11%～24%为1分，25%～49%为2分，50%～74%为3分，≥75%为4分。两者相加为最终免疫组化结果：0～1分为阴性，2～3分为弱阳性(+)，4～5分为阳性(++)，6～7分为强阳性(+++)。 　　1.4 统计学处理 　　所得半定量资料用Χ2检验，两样本率的相关性分析用秩相关分析法。 　　2 结果 　　2.1 RhoC表达与胃癌临床病理学特征的关系 　　54例胃癌组织中，27例RhoC蛋白表达阳性(50.00%);其表达与胃癌患者的性别、年龄、肿瘤原发部位、原发肿瘤大小无明显相关(P0.05);但是随浸润深度的加深、分化程度的降低、淋巴结转移的发生，其阳性表达率明显升高;其中未侵及浆膜组与侵及浆膜组的RhoC蛋白阳性表达率分别为34.29%(12/35)和78.95%(15/19)，差异显著，有统计学意义(P0.01);高-中分化组与低分化组RhoC蛋白阳性表达率差异显著，有统计学意义(P0.01);淋巴结转移组与无淋巴结转移组的RhoC蛋白阳性表达率分别为86.96%(20/23)和22.58%(7/31)，差异显著，有统计学意义(P0.01)，见表1。表1 RhoC在胃癌组织中的表达情况与临床病理特征的关系 　　2.2 MMP-9表达与胃癌临床病理学特征的关系 　　MMP-9蛋白的阳性表达率随浸润深度的加深、分化程度的降低、淋巴结转移的发生而升高(P0.05)，而与患者性别、年龄、肿瘤的原发部位及肿瘤的大小无明显相关(P0.05)。本组54例胃癌组织中MMP-9阳性表达者共40例，其中未侵及浆膜组与侵及浆膜组的MMP-9蛋白阳性表达率差异显著，有统计学意义(P0.05);高-中分化组与低分化组MMP-2蛋白阳性表达率差异显著，有统计学意义(P0.05);淋巴结转移组与无淋巴结转移组的MMP-9蛋白阳性表达率差异显著，有统计学意义(P0.05)，见表2。表2 MMP