zz15感染性休克大鼠JAKSTAT对组织IFNγ表达的影响.docVIP

感染性休克大鼠JAK/STAT对组织IFN-γ表达的影响 解放军251医院麻醉科，张家口075000 王松柏 曹怀宇 干扰素-γ（IFN-γ）过渡表达是脓毒症及其全身炎症反应综合症的主要作用机制之一，其合成释放与JAK/STAT(janus kinase/signal transducer and activator of transcription)信号通路密切相关。本研究旨在对脓毒症时大鼠JAK/STAT通路与组织中IFN-γ表达之间的关系进行探讨。 60只雄性清洁级Wistar大鼠，随机分为3组。①盲肠结扎穿孔（CLP）组， 0 h点动物在麻醉后即刻处死(不行CLP术)、其它分别于CLP后2、6、24 h处死；②JAK抑制剂-AG490治疗组，CLP前半小时皮下注射AG490（8mg/kg）；③STAT抑制剂-雷帕霉素（RPM）治疗组，CLP前半小时皮下注射RPM（0.4mg/kg），两个处理组分别在CLP后2、6、24 h处死。动物观察至不同时相点处死留取组织待测。 采用RT-PCR）法检测组织γ mRNA表达量；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测IFN-γ蛋白含量。与正常肝、肺组织相比，CLP后大鼠IFN-γ mRNA在2h和6h显著升高，IFN-γ 蛋白在2h和6h升高2倍多，mRNA 和蛋白水平均在24h恢复至正常水平（P0.05或0.01）。与CLP组相比，AG490和RPM处理后，大鼠IFN-γ mRNA和蛋白水平在2和6h时间点均不同程度地下降（P0.05或0.01）。 IFN-γ在免疫调节中起着关键性作用；同时在宿主对微生物感染的免疫防御中也扮演着关键的角色。IFN-γ其表达水平的强弱与机体的免疫状态密切相关。其适量表达有利于机体炎症反应和机体清除体内微生物等致病因素，但过量表达将可能对机体和组织产生损害作用。本实验显示，脓毒症发作后数小时循环中IFN-γ mRNA和蛋白水平迅速增加，蛋白水平最高达正常时的数倍，随后逐渐下降并向正常水平接近。同时CLP组大鼠在脓毒症发作后表现出重度休克症状，如呼吸急促、腹泻、立毛和毛色干枯等。提示本实验脓毒症发作后数倍升高的IFN-γ有可能介导了脓毒症所导致的组织损伤。 本实验组此前的实验发现抑制JAK/STAT信号通路的活化有助于减轻脓毒症大鼠重要器官的损伤，本实验旨在进一步探讨其作用机制。在应用JAK和STAT抑制剂抑制JAK/STAT信号通路的活化后，CLP后肝和肺组织IFN-γ mRNA和蛋白水平均有不同程度的下降。显示，JAK/STAT信号通路可能主要通过转录水平对IFN-γ mRNA的调节来调节其蛋白水平的表达。所以，此前我们实验显示抑制JAK/STAT信号通路有助于防止脓毒症大鼠组织损伤，这可能是通过抑制JAK/STAT信号通路的活化而下调IFN-γ的合成。 总之, JAK/STAT信号通路参与了脓毒症大鼠组织IFN-γ合成的调控；通过干预JAK/STAT通路可调节IFN-γ的合成，并可能与脓毒症大鼠组织器官损伤相关．这也许是防治和治疗MODS和脓毒症的新药物靶点。 1