不同光环境对幼兔眼球发育影响.doc

不同光环境对幼兔眼球发育的影响 　　[摘要] 目的 观察不同光环境对幼兔眼球发育的影响。 方法 将24只1月龄新西兰幼兔随机分为自然光组、全光谱组与日光灯组。自然光组饲养在正常自然光线的照射环境中。全光谱组饲养在全光谱环境下。日光灯组饲养在日光灯环境下。人工光源根据外界光强度的变化自动调节照明度，使照明节律与自然光一致。饲养3个月后观察三组幼兔眼轴长度及视网膜透射电镜超微结构变化。 结果 正视化过程中，三组幼兔眼轴长度均有所增加，自然光组与全光谱组增加程度比较差异无统计学意义（P 0.05），而日光灯组增加的程度显著大于自然光与全光谱组（P 0.05）， while the increase degree of fluorescent light group was dramatically greater than that of natural light group and full spectrum group （P 　　1 材料与方法 1.1 实验动物及分组 1月龄健康无眼病新西兰幼兔24只，雌雄各半，体质量0.5～1.0 kg，由青龙山实验动物中心提供，兔配合饲料，自然温度下培养。分组：采用完全随机化分组方法将其分为三组，对24只幼兔进行编号1～24，随机抽取8个数字对应编号的幼兔为自然光组，同样方法抽取全光谱组与日光灯组 1.2 主要实验设备 ①南京中医药大学提供实验房间。②光照控制架，由南京理工大学及东南大学研制，规格1.5 m×0.5 m×1.7 m（长×宽×高）。LED灯架：灯架安装数排多个小功率LED灯便于照度调节，灯架安装感光自动调节照明装置，可根据外界光强度的变化自动调节照明度，保持与自然光一致。全光谱灯箱：灯架安装全光谱灯，灯架安装感光自动调节照明装置，可根据外界光强度的变化自动调节照明度，保持与自然光一致。③光源：LED灯选用正白光LED灯，型号：RJP-P1W140P1-130T，色温6000-6500K，深圳瑞佳鸿光电有限公司。全光谱灯选用SOLUX石英卤素灯，型号：Q35MR16/CG/47/36，色温6000-6500K，美国EIKO公司 1.3 主要仪器 TP1020自动脱水机（德国LECIA公司）；RM2235型石蜡切片机（德国LECIA公司）；康克新柏图文分析软件；眼轴A超测量仪（无锡康宁公司）；Tissue-Tek TEL组织包埋机（日本SAKURA公司）；LEICADM-1000光学显微镜（德国LECIA公司）；隔水式电热恒温培养箱（上海市跃进医疗器械一厂）；JEM-1010透射电镜（日本电子公司）；体重秤（江苏威衡电子秤公司） 1.4 光照动物模型制作 自然光组饲养在正常自然光环境下。全光谱组饲养在全光谱环境下。日光灯组饲养在日光灯环境下。幼兔饲养在光照控制箱内，自由饮水和进食，温度控制在22～24℃。使用感光自动调节照明装置，使各箱内照明节律与自然光一致。饲养时间为3个月 1.5 眼轴测量 测量前用复方托吡卡胺滴眼液点眼表面麻醉，5 min 1次，2次后测量眼轴。测量位置取角膜中心稍偏颞下部位，每眼测量3～5次，取平均值 1.6 电镜观察 3个月后耳缘静脉空气针处死幼兔，摘除眼球。迅速取颞侧视网膜少许修成约1 mm2大小共3小块，5%的戊二醛固定，放入4℃ pH7.2的PBS缓冲液浸洗，1%锇酸固定40 min，巴比妥缓冲液浸洗，梯度乙醇、丙酮脱水，无水乙醇与环氧树脂浸透、包埋，半薄切片光学显微镜下定位，修剪成块状，超薄切片，厚度40～60 μm，醋酸铀和橼酸铅双染，透射电子显微镜观察并拍照 1.7 统计学方法 采用SPSS 19.0统计软件进行分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，采用方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验，以P 0.05），日光灯组眼轴长度显著大于其他两组（P 0.05）。不同时间点测定结果来看，三组眼轴长度发育趋势为随时间延长而增加，且日光灯组变化显著（P 　　日光灯作为人工光源，光谱分布是不连续的几条强光谱线，其与自然光有很大差异，Schwahn等[15]研究表明日光灯作为频闪光，对视网膜有明暗强烈的光刺激，从而导致视网膜图像的时空信号通路不能充分激活，使视网膜的其他通路被激活以诱导近视性改变。徐金华等[16]研究表明日光灯的灯光闪烁，稳定相差，每秒有几十次人眼感觉不到的明暗变化，极易使眼睛产生疲劳，且日光灯在与全光谱灯相同积分亮度下所发出的几条光谱特别强，强烈刺激眼睛，造成视网膜的光损伤。视网膜光损伤主要累及视网膜的光感受器细胞和色素上皮细胞，电镜表现主要为核质岛样浓缩及线粒体肿胀，脊断裂，最后表现为核溶解[17]。光性损伤是由于光作用于视网膜产生大量自由