罗汉果植株提取物有效成分鉴定.docVIP

罗汉果植株提取物有效成分鉴定 1、仪器和材料 Thermo Nicolet Nexus 470型红外光谱仪。Varian INOVA 500型核磁共振波谱仪，TMS为内标，吡啶-d5或DMSO-d6为溶液。柱色谱用硅胶(200-300目)及TLC硅胶GF245均为美国大西洋公司高效薄层层析硅胶板Amberlite XAD16由美国罗姆—哈斯公司Rohm-Hass AG）生产；Sephadex LH-20(25～100 μm)由Pharmaeia公司生产；其余试剂为分析纯或色谱纯。罗汉果叶和藤采自广西龙胜县。 2、提取与分离 将2.65Kg罗汉果叶、藤粉碎，用53L80%乙醇回流提取2次，每次提取2小时。减压条件下，乙醇提取液浓缩，得到450g浓缩物，收率17.0% ；将其溶入到2.5L水中，并依次用己烷（2.5L×5次），乙酸乙酯（2.5L×5次）和正丁醇（2.5L×5次）萃取。所得的正丁醇萃取液真空浓缩，得到褐色浓缩物92g，收率3.47%。该物质通过大孔吸附树脂柱色谱（树脂为Amberlite XAD16 ，800g），依次用浓度为0%、10%、30%、50%、70%、90%、100%乙醇溶液洗脱。50％Et0H洗脱部分反复通过TLC硅胶柱色谱分离纯化，得到与活性相关的组分。在重结晶之后，得到暗黄色针状结晶物2g。 2、结构鉴定 暗黄色针状晶体，C27H30O14；熔点mp1880C；MW：578。1H-NMR (400MHz, DMSO-d6) (： 6.45 (1H, d, J = 2.4 Hz, H -6)， 6.78 (1H, d, J = 2.4 Hz, H-8)， 7.79 (2H, d, J = 8.4, 2.0 Hz, H-2, 6)， 6.92 (2H, d, J = 8.4, 2.0 Hz, H-3, 5)， 5.55 (1H, d, J = 1.6 Hz, 7-O-Rha- H-1)， 5.30 (1H, d, J = 1.6 Hz, 3-O-Rha-H-1)， 0.81 (3H, d, J = 5.6 Hz, 3-O-Rha-H-6)， 1.13 (3H, d, J = 5.6 Hz, 7-O-Rha-H-6)， 12.6 (5-OH, s)， 10.2 (4-OH, s)。13C-NMR (100MHz, DMSO-d6) (: 156.1 (C-2)， 134.5 (C-3)， 177.9 (C-4)， 160.9 (C-5)， 99.5 (C-6)， 161.7 (C-7)， 94.6 (C-8)，157.8 (C-9)， 105.8 (C-10)， 120.4 (C -1)， 130.7 (C -2, 6)， 115.4 (C-3, 5)， 160.2 (C-4)。 3-O-Rha： 101.9 (C-1), 70.2 (C-2)， 70.7 (C-3)，71.6 (C-4)，70.1 (C-5)， 17.5 (C-6)；7-O- Rha：98.4 (C-1)， 70.1 (C-2)， 70.3 (C-3)， 71.1 (C-4)， 69.8 (C-5)，17.9 (C-6)。 该化合物与山柰苷混合熔点不下降；核磁共振谱与山柰苷的文献资料一致，证明该化合物为山柰苷。 参阅文献： 1、Chen, Chung-Yi. Chinese Pharmaceutical Journal (Taipei, Taiwan) 2004, 56(3-6): 141-146 2、 Urgaonkar, Sameer. Journal of Organic Chemistry 2007, 72(12): 4582-4585 3、Ouyang, Ming-An. Natural Product Research 2003, 17(6): 381-387 4、杨秀伟,张建业,钱忠明.罗汉果中新的天然皂苷中草药2008,39(6):810-814 目的研究罗汉果的化学成分。方法采用多种色谱技术进行分离纯化,应用核磁共振波谱法和质谱法等技术确定化合物的结构。结果从罗汉果中分离和鉴定了10个化合物,分别为山柰酚(Ⅰ)、山柰酚7-O-α-L-鼠李糖苷(Ⅱ)、山柰苷(Ⅲ)、罗汉果皂苷E(Ⅳ)、罗汉果皂苷(Ⅴ)、山柰酚3-O-α-L-鼠李糖苷-7-O-[β-D-葡萄糖基(1-2)-α-L-鼠李糖苷](Ⅵ)、罗汉果皂苷A(Ⅶ)、光果木鳖皂苷(Ⅷ)、罗汉果皂苷(Ⅸ)和罗汉果皂苷A1(Ⅹ)。结论化合物Ⅶ和Ⅹ为新的天然产物,Ⅰ为首次从罗汉果中分离得到。【作者单位】：北京大学药学院天然药物学系天然药物及仿生药物国家重点实验室;香港理工大学【关键词】：罗汉果;罗汉果皂苷ⅣA