水产品中天然毒素及检验方法资料.pptVIP

水产品天然毒素及其检测技术;水产品天然毒素分类;1.1 河豚毒素;河豚毒素的检验方法 生物检测法：小鼠生物检测法和组织培养分析法。 仪器检测法： 荧光检测法是检测方法之一, 主要是利用河豚毒素加碱水解后生成C9 碱, 该物质在特定波长发荧光, 从而可进行检测。 薄层层析(TLC)用于河豚毒素的定量测定。 高效液相色谱(HPLC)反相色谱, 用硅胶柱作固定相。 免疫检测法：主要有单克隆抗体法(McAb)应用原理是指在特异性抗原刺激机体后，产生相应抗体。抗原与抗体都是蛋白质，抗体为免疫球蛋白。它们之间可以相互识别，并发生结合反应，从而确定是否有毒。 ;1.2 西加毒素;西加毒素( c iguatox in, CTX)是20世纪60年代从毒爪哇裸胸鳝肝脏中提取发现的, 它是深海藻类分泌的毒素, 被热带或亚热带食草性鱼类蓄积并在鱼体内被氧化而成的一类强毒性聚醚类毒素, 通过食物链逐级传递和积累, 最终传递给人类。据报道全世界每年至少2万人不同程度的遭受CTX的伤害, 食入0. 1 Lg的CTX 可使一个成年人致病。CTX中毒最显著的特征是干冰的感觉和热感颠倒, 即当触摸热的东西会感觉冷, 把手放入水中会有触电或摸干冰的感觉。;CTX的检测方法 生物毒性试验( 小白鼠法) 方法的原理是对毒素采用适宜的提取方法, 将样品中的毒素转移到提取液中; 通过向固定种系和体重的小白鼠腹腔注射样品提取液, 记录小白鼠的存活时间以计算样品毒素的量。 高效液相色谱分析(HPLC) 方法的原理是利用毒素分子结构上的羟基反应生成荧光性物质, 然后在FLD上检测, 线性较好, 极限浓度可达3. 5 ng /kg。 细胞毒性试验( cell bioassay) 细胞毒性试验是CTX 主要作用于神经末梢和中枢神经节利用毒素对细胞的毒性来检测毒素的一种技术。 免疫学测定法( immunoassays) 该方法是利用抗原与抗体专一、特异结合的特点, 从而对毒素进行定性定量的检测。;2 贝类毒素;2.1麻痹性贝类毒素（PSP）;2.2 腹泻性毒素（DSP） 腹泻型贝类中毒一般分布于生长环境中的浮游生物，特别是赤潮生物鳍藻有关，在赤潮区生长的贝类很容易积累腹泻型贝类毒素。 ;2.3 神经性贝类毒素（NSP） 引起人产生以神经麻痹为主的中毒症状???毒性较低，未见有死亡报道。神经性贝毒分布范围较小，主要分布在美国佛罗里达海岸和墨西哥湾沿岸，以及欧洲和新西兰。;2.4 记忆缺损贝类毒素（ASP） ASP 的主要成分是一种具有生理活性的氨基酸类物质-软骨藻酸（Domoic acid，DA）是浮游植物代谢的产物，他能提高钙离子的渗透性，使细胞长时间处于去极化的兴奋状态而导致死亡[8]。ASP 能够导致头晕眼花，短时期内失去记忆力，但在人体内的降解速度也快。目前许多国家对贝类中DA 的控制标准为20 μg/g。;贝类毒素的检测方法;三、免疫检测法 免疫学方法检测贝毒的技术已经得到了初步的应用，但是免疫技术和贝毒本身存在的一些问题,如产生抗体的交叉反应、系列标准毒素的缺乏以及像酶联免疫吸附试验、钠离子通道受体结合试验等还存在着各种不足之处，但由于免疫检测法有快速、简便、灵敏、特异、经济的优点，因此有着广阔的应用发展前景。 方法：放射免疫（RIA）法，酶联免疫吸附测定（ELISA）法，竞争性酶免疫分析（EIA）法。;