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2-甲氧雌二醇作用机制研究进展* 摘要】 2-甲氧雌二醇作为雌二醇代谢产物，具有抑制肿瘤生长和转移的作用。由于该药只对增殖活跃的细胞有作用，而对静止细胞无作用，因而不良反应较小，故近年来日益受到重视，细胞周期停滞、诱导细胞凋亡及抑制血管新生是其抗肿瘤作用的主要机制。 目前 2-甲氧雌二醇已进入临床期试验阶段，并显示出了良好的 应用 前景。 【关键词】 2-甲氧雌二醇；细胞周期停滞；细胞凋亡；血管新生 2-甲氧雌二醇（2-methoxyestradiol）为雌二醇的代谢产物，由雌二醇2位碳原子先羟化再甲基化形成。化学名为17β-2-甲氧基雌-1，3，5（10）-三烯-3，17-二醇。因可以抑制血管新生，且不良反应较小，而广泛用于肿瘤的 治疗 ，目前处于临床II期 研究 中。研究表明2-甲氧雌二醇对雌激素受体的亲和力较低，而且雌激素受体激动剂和拮抗剂对其作用也没有 影响 ，表明2-甲氧雌二醇似乎并不是通过影响雌激素受体通路而起作用［1］。 1 药理作用特点 近年来认为，2-甲氧雌二醇具有抗肿瘤的作用，且治疗耐受性较好。Cushman M等［2］报道2-甲氧雌二醇对55种不同肿瘤细胞株有抑制作用。在一项多中心、随机、双盲的II期临床试验［3］中，33名雄激素抵抗型前列腺癌患者随机给予400mg/d，1200mg/d的2-甲氧雌二醇，发现400mg/d剂量组患者在用药第1天和第28天的血药浓度峰值（Cmax）分别为2.2 ng/ml，5.5ng/ml，1200mg/d剂量组则分别为2.6 ng/ml，9.6ng/ml。两个剂量组之间的生物利用度没有显著差异，表明该药吸收有限。2-甲氧雌二醇治疗后，患者的前列腺特异抗原（PSA） 水平稳定和降低；血管内皮生长因子（VEGF）及成纤维细胞生长因子（bFGF）的水平在用药1个月时较用药前下降40%，而用药3个月时，则较用药1个月再下降55%。研究表明80%～95%的2-甲氧雌二醇在17位氧化，该代谢产物的活性不及原型药物的1/10。在33名患者中有3人出现AST和ALT水平的升高（2或3级肝功能异常），但停药后迅速回复到正常水平，且血浆2-甲氧雌二醇浓度和肝功能异常之间没有相关性，患者亦未出现4级肝功能异常。 除了对肿瘤细胞的作用，2-甲氧雌二醇还可阻断卵巢颗粒细胞有丝分裂，促进其凋亡［4］，提示该药具有潜在的抑制卵泡血管生成的作用，故可进一步研究用于女性生殖系统血管相关性疾病的治疗。 2 细胞周期停滞 已证实2-甲氧雌二醇可以使鼻咽癌细胞［5］，子宫颈癌细胞［6］和前列腺癌细胞［7］等很多肿瘤细胞的有丝分裂停滞于G2/M期，这可能与其抑制微管蛋白聚合以及对细胞周期的调节作用有关。 2.1 抑制微管蛋白聚合 Robert W等［8］采用微管蛋白聚合检测，即将微管蛋白与2-甲氧雌二醇孵育（37）15min后转移至试管中，冰浴。加入GTP再恢复至室温，微管蛋白聚合开始，结果可见，3μmol/L 2-甲氧雌二醇可抑制微管蛋白聚合达34%。 2.2 对细胞周期的调节作用 研究发现2-甲氧雌二醇抑制骨肉瘤143B细胞周期的作用是剂量依赖的，1μmol/L时33%的细胞停滞在G1期，10μmol/L时则有58%的细胞聚集在G2/M期［9］。2-甲氧雌二醇可通过细胞周期调节因子而发挥作用。P34cdc2和Cyclin B复合物是通过促进染色体浓缩、细胞骨架重构以及核膜降解来发挥调节细胞由G2期进入M期的进程的。而2-甲氧雌二醇作用于G2/M期MCF-7细胞后，可以显著降低P34cdc2的水平［10］。 3 促进细胞凋亡 细胞凋亡的途径通常有两条，一条是通过细胞外信号激活细胞内的凋亡蛋白酶caspase；一条是细胞应激反应或凋亡信号首先引起线粒体细胞色素c释放，然后作为凋亡诱导因子，细胞色素c与凋亡蛋白酶激活因子（Apaf-1）、caspase-9前体、ATP/dATP形成凋亡酶体复合物，召集并激活caspase-3，进而引发caspase级联反应，这些活化的caspase可将细胞内的重要蛋白降解，导致细胞凋亡。2-甲氧雌二醇促进细胞凋亡的效应正是通过这两条途径发挥作用的［11］，具体机制如下。 3.1 促进活性氧（ROS）生成 目前普遍认为细胞色素c是通过线粒体膜通透性转运孔（MPT）释放到胞质中的，而当各种因素导致线粒体功能紊乱时，MPT的开放与细胞中ROS的堆积密切相关［12］，后者又产生大量超氧阴离子自由基，使细胞凋亡呈现不可逆状态。2-甲氧雌二醇1μmol/L处理后的大鼠DS肉瘤细胞，过氧化脂质生成增高1.5倍，而浓度升至5μmol/L时，过氧化脂质生成增高2.2倍［13］。这一结果提示2-甲氧雌二醇可促进ROS的生成，进而引起该肿瘤细