大孔树脂法纯化妙疹膜气雾剂醇提液的工艺研究-第三军医大学学报.doc

大孔树脂法纯化疹妙喷雾膜剂醇提液的工艺研究 李军艳1，李富玉2，阿古拉2，张 伟3，张云丽3 (266071山东 青岛，济南军区青岛第一疗养院理疗科1；266071山东 青岛，济南军区青岛第一疗养院中医科2；266033山东 青岛，青岛市海慈医疗集团医院药剂科3) [摘要] 目的：筛选适合分离纯化疹妙喷雾膜剂组方药物醇提液中苦参碱类成分的大孔吸附树脂并确立精制纯化该提取液的最佳工艺参数。方法：采用溴麝香草酚蓝比色法，在412nm测定提取液的光密度值为指标，单因素实验考察静态下6种大孔吸附树脂D113、D152D301、D315NKA-9和AB-8型的吸附性能，选择最佳吸附树脂型号；单因素实验考察乙醇洗脱剂浓度；L9(34)正交设计考察药液量、乙醇用量、洗脱速度等的最佳工艺条件。结果：大孔树脂法纯化组方药物醇提液，NKA-9型树脂优于D113、D152D301、D315L提取液用100g NKA-9型树脂、80%乙醇140mL为洗脱剂，洗脱速度2mL/min时的纯化效果最好。生物碱类成分可以保留近85%（84.23%）。结论：NKA-9型大孔树脂能比较完整纯化疹妙喷雾膜剂组方药物醇提液生物碱类药效成分。 [关键词] 乙醇提取液；苦参碱类成分；大孔吸附树脂；洗脱剂；光密度 [基金项目]全军医药卫生科研基金课题（2006042001） [通信作者]李富玉，E-mail:jyli1972@126.com 疹妙喷雾膜剂是由苦参、白鲜皮、地肤子、土茯苓和防风等5味药制成乙醇提取液，经精制后加入一定量的醇溶性成膜材料，制成的一种胶溶型中药喷雾膜剂。本实验采用溴麝香草酚蓝比色法[1]，测定提取液的光密度值为指标，单因素实验选择吸附树脂型号、乙醇洗脱剂浓度，L9(34)正交设计考察药液量、乙醇用量、洗脱速度等的最佳工艺条件，优化该组方药物乙醇提液大孔树脂法纯化的最佳工艺，旨在为完善制备工艺提供依据。 1 材料与方法 1.1仪器与试剂 84-2型数显搅拌恒温电热套(菏泽电子控温技术研究所)；HH-2数显恒温水浴锅(江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司)；AE200S电子分析天平(梅特勒一托利多仪器(上海)有限公司)；UV-1800型紫外分光光度计（日本岛津），BuchiR215V 型旋转蒸发仪(瑞士)，KQ100型超声波清洗器(昆山)，层析柱(上海盛惠玻璃仪器厂)，D113、D152D301、D315NKA-9和AB-8型大孔吸附树脂（天津南开大学化工厂 1.2实验方法 1.2.1吸附树脂的选择 提取液制备 按处方比例称取药材粉碎成粗粉，取220g，按正交实验优化工艺结果加入7倍量的70%乙醇提取3次，每次40min[2]；合并提取掖，抽滤；将滤液置旋转蒸发仪上，回收乙醇至无醇味，浓缩液加水定容至250 mL,备用(药液浓度为药材-药液=1∶1.17)。 吸附树脂的考察 根据组方药物主要有效成分生物碱类（苦参、白鲜皮）、黄酮类（苦参、白鲜皮、土茯苓）、皂苷类（土茯苓）、挥发油和多糖类（防风）等弱极性的性能特点， 依据“相似物易吸附相似物”的原则，选择非极性或弱极性的D113、D152D301、D315NKA-9型6种树脂，考察各种树脂的吸附效果。 吸附树脂预处理 称取20g D113型树脂，用95%乙醇浸泡24h，湿法装柱（柱直径1cm），依次用2%NaOH 50mL淋洗树脂、蒸馏水洗至中性、2% HCl 50mL淋洗树脂、蒸馏水洗至中性、95%乙醇50mL淋洗、蒸馏水洗至无醇味，再将装柱树脂放入真空干燥箱中干燥，备用。其他型号树脂同法操作进行预处理。 1.2.2树脂静态吸附容量测定实验 取制备的组方药物提取液100mL，用2%NaOH的调pH为10~11，分别吸取每份10.0 mL共6份，分别置于l00mL三角烧瓶中；分别准确称取经过预处理的6种型号树脂各2 g，分别加到上述三角烧瓶中；于20℃恒温水浴箱中放置60min，待充分吸附后过滤（含静态吸附后剩余药物成分）；将滤液至蒸发皿中，水浴上挥净乙醇至无醇味，移至分液漏斗中；适量氯仿洗涤蒸发皿，洗涤液倒入上述分液漏斗中，用氯仿萃取3次（3、2、2 mL）；合并氯仿萃取液，移至分液漏斗中，加入2% HCl调pH至3~4，移取酸水液至分液漏斗中，用2% NaOH碱化调pH为10~11，用氯仿萃取3次（3、2、2mL）至水层液生物碱反应阴性；氯仿萃取液定溶至10.0mL；吸取氯仿萃取液100μL，置分液漏斗中，加入pH=7. 6的溴麝香草酚蓝磷酸盐缓冲溶液6 mL,氯仿6 mL,闭塞剧烈振摇3 min , 静置30 min后，使水层与氯仿层完全分离后,分取氯仿层(黄色),制成6份样品待测液。 1.2.3空白对照液制备 取pH=7.6的溴麝香草酚蓝磷酸盐缓冲溶液6 mL置分液漏斗中,加入氯仿6 mL