培训课件：食品中蛋白质的测定GB_5009.5-2010课件.pptVIP

第二步——蒸馏： 样液中的硫酸铵在碱性条件下释放出氨，在这操作中。 一是加入氢氧化钠溶液要过量，如果NaOH量加的不够就变成H2S， H2S是强酸，使颜色变红。 二是要防止样液中氨气逸出。 第三步——吸收与滴定： 蒸馏过程中放出的氨可用一定量的标准硫酸或标准盐酸溶液进行氨的吸收，然后再用标准氢氧化钠溶液反滴定过剩的硫酸或盐酸溶液，从而计算出总氮量。（全量） 半微量或微量定氮通常用硼酸溶液吸收后，再用标准盐酸直接滴定，硼酸呈微弱酸性，用酸滴定不影响指示剂变色反应，它有吸收氨的作用。（用硼酸代替H2SO4，这样可省略了反滴定，H2SO4是强酸，要求较严，而硼酸是弱酸，在滴定时，不影响指示剂变色范围，另外硼酸为吸收液浓度在3%以上可将氨完全吸收，为保险起见一般用4%）。 滴定 终点 至灰色或蓝紫色 实验注意事项 1.样品应是均匀的，若是固体样品应事先研细，液体样要混合均匀。 2.样品放入K氏烧瓶时，不要粘在瓶颈上，万一粘附可用少量水缓慢冲下，以免被检样消化不完全，使结果偏低。 3.消化时，如不容易呈透明溶液，可将K氏烧瓶放冷后，加入30%过氧化氢催化剂2~3ml，促使氧化。 4.在整个消化过程中，不要用强火，保持和缓的沸腾，使火力集中在K氏烧瓶底部，以免附在壁上的蛋白质在无硫酸存在的情况下，使氮有损失。 5.如硫酸缺少，过多的硫酸钾会引起氨的损失，这时会形成硫酸氢钾，而不与氨作