SUMO-β-抑制蛋白2融合基因的克隆、表达与蛋白纯化.pdfVIP

第24 卷 第1 期 天 津 农 学 院 学 报 Vol. 24 ，No. 1 2017 年3 月 Journal of Tianjin Agricultural University March ，20 17 文章编号：1008-5394 （2017 ）0 1-0048-04 SUMO-β-抑制蛋白2 融合基因的克隆、表达与蛋白纯化 1 1 1 1 1 1 2，通信作者 张耀方 ，许艳玲 ，黄治强 ，杜莉 ，陈曦 ，付裕 ，李明刚 （1. 天津农学院 基础科学学院，天津 300384 ；2. 南开大学 生命科学学院，天津 300071 ） 摘 要：2 型糖尿病是一种常见的慢性疾病，其发生与胰岛素的耐受相关。 β-抑制蛋白 2 （β-arrestin2 ）的缺失或功能紊乱，会导致胰岛素抵抗和 2 型糖尿病的发生。而使用 β-arrestin2 进 行治疗可明显缓解葡萄糖不耐受及胰岛素抵抗。本研究通过重组 PCR 方法，将小分子泛素相关修 饰物（small ubiquitin-related modifier ，SUMO ）与 β-arrestin2 基因融合，再将融合基因插入原核表 达载体 pET22b 中，成功构建了 pET22b-SUMO - β-arrestin2 表达载体，将重组表达载体转入大肠杆 菌 Rosetta Blue （DE3 ）宿主细胞，使用IPTG 在温度为 20 ℃诱导表达，再将诱导表达后的蛋白经 Ni-NTA 进行纯化 ，成功获得 SUMO-β-arrestin2 蛋白，为后续 β-arrestin2 药效学的研究奠定基础。 关键词：β-抑制蛋白 2 ；糖尿病；表达；纯化 中图分类号：Q813 文献标识码：A Cloning and Expression of SUMO-β-arrestin2 Fusion Gene and Purification of Recombinant Protein 1 1 1 1 1 1 ZHANG Yao-fang , XU Yan-ling , HUANG Zhi-qiang , DU Li , CHEN Xi , FU yu , LI Ming-gang2,Corresponding Author （1. College of Basic Science, Tianjin Agricultural University, Tianjin 300384, China; 2. College of Life Science, Nankai University, Tianjin 300071, China ） Abstract: Ty