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2015-2016学年高二生物人教版选修3课件:专题112基因工程的基本操作程序
1.2 基因工程的基本操作程序;;预习导学 挑战自我,点点落实;2.目的基因的获取
(1)目的基因
主要是指 的基因,也可以是一些具有 的
因子。
(2)常见方法
①从基因文库中获取
基因文库的种类;②利用PCR技术扩增目的基因
a.原理: 。
b.条件: 、DNA模板、 、四种脱氧核苷酸。
c.过程:目的基因DNA受热变性后解链为单链, 与单链相应互补序列结合,然后在 作用下进行延伸,如此重复循环多次。
d.结果:每一次循环后,目的基因的量可以 ,即成指数形式扩增(约为2n,n为扩增循环的次数)。;③人工合成法:如果基因比较小, 又已知,可借助 用化学方法直接人工合成。;二、基因表达载体的构建(阅读P11);3.基因表达载体的构建过程
一般用同一种 酶分别切割载体和目的基因,再用
酶把两者连接。;三、将目的基因导入受体细胞(阅读P11-13);(2)导入动物细胞
①方法: 技术。
②常用受体细胞: 。
(3)导入微生物细胞
第一步:首先用 处理细胞,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态,这种细胞称为 细胞。
第二步:将 溶于缓冲液中与 细胞混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收 ,完成转
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