第八章 真核生物的转录.ppt

真核生物的转录 主讲人：杨江科 概述 真核生物的转录过程 真核生物的转录因子 原核生物与真核生物转录的比较分析 一、原核生物与真核生物mRNA的特征比较 1、原核生物mRNA的特征 ● 半衰期短 ● 多以多顺反子的形式存在 ● 5’ 端无“帽子”结构， 3’ 端没有或只有较短的poly（A ）结构。 2、真核生物mRNA的特征 原核生物和真核生物mRNA结构的比较 2、真核生物转录过程 起始 延伸 终止 起始 真核生物的转录起始上游区段比原核生物多样化，转录起始时，RNA-pol不直接结合模板，其起始过程比原核生物复杂。 RNA聚合酶不能独立的起始，需要辅助因子（转录因子）； RNA聚合酶更多样（I，II，III） 启动子结构更复杂 启动子区，上游控制元件（UCE），增强子； 延伸 5’-3’方向; 在部分富含A/T的区段可能会出现提前终止 终止 无特定的终止子序列 可在无辅助因子参与下终止; 一串A残基常足以终止转录; Xenopus borealis 5’-GCAAAAGC-3’为终止序列; mRNA:识别未端加尾信号. 一、RNA聚合酶酶学特征 三种RNA聚合酶都含有12个或更多亚基的大分子； 大亚基与E. coli同源性高； 至少五种小亚基由三种聚合酶共有； 转录的起始需要特额外的起始蛋白质的参与 TF因子（Tanscription factors） 二、真核生物启动子的结构类型 I类启动子 II类启动子(启动子Ⅱ最为复杂) III类启动子 RNA聚合酶II类启动子 负责转录编码核糖体RNA的多顺反子； RNA聚合酶I的启动子有两部分组成： 转录起点附近核心启动子（core promotor） 核心启动子从-45到+20，负责转录的起始。 起点5‘上游100bp左右的上游控制元件（UCE）。 UCE从-180延伸到-100，此区可增加核心元件的转录起始的效率； RNA pol I需要2种辅助因子： UBF1（上游结合因子1）。 二个UBF1因子结合并回折 SL1因子，SL1含有4个蛋白，其中之一称为TATA框结合蛋白（TBP）。 SL1的结合使得RNA pol I与UBF1复合体结合，起始转录。 III类启动子 5S RNA和tRNA都属于RNA聚合酶III启动子； 起始点（A框和B框）位于下游的转录区，称为下游启动子； 非洲爪蟾的5s RNA基因启动子 下游启动子又可分为I型和II型； I型内部启动子含boxA（TGGCNNAGTGG）和boxC(CGGTCGANNCC)序列。 II型内部启动子含有两个分开的boxA和boxB。II型内部启动子中boxA和boxB之间的距离较宽。 内部启动子中的起始的各个阶段，这需要涉及3个起始因子； TFIIIA与boxC相结合； TFIIIB与boxA上游50bp序列处相结合； TFIIIC与tRNA启动子框相结合. 上游启动子; U6 snRNA基因的启动子和常见的启动子一样位于起始点的上游，称上游启动子。 真核生物RNA聚合酶II 启动子的结构 1、核心启动子 ●定义：指保证RNA聚合酶Ⅱ转录正常起始所必需的、最少的DNA序列，包括转录起始位点及转录起始位点上游TATA区 2、上游启动子元件 ●包括CAAT盒（CCAAT）和GC盒（GGGCGG）等 SV40 早期启动子 组蛋白H2B 增强子 增强子（enhancer）：远上游序列（1000kb以上） 能显著提高基因的转录效率的一类顺式调控元件； 激活转录，并大大提高转录效率； 具有远距离效应， 作用与位置无关，可在基因5-上游、基因内或3-下游序列； 具有组织和细胞的特异性； 转录起始复合物的结构 RNA聚合酶II TFII因子（Transcription factor） TFIIA、TFIIB、TFIIE、TFIIF、TFIIH、TFIIJ TFIID TAF因子（Transcription associate factor） TBP(Transcription binding protein) 转录因子 转录复合体 TBP TAFs TFIIA TFIIB TFIIF Pol II TFIIE RNA pol Ⅱ的转录起始 TFIID 负责与启动子元件TATA框结合； TBP (Transcription binding protein) 与启动子TATA框结合，并转链； 蛋白质的外表面与其它蛋白质相互作用. TAFs(transcription associate