分子生物学讲义TBHBVHCV2012-02-27.pptxVIP

1 分子生物学检测的临床应用及进展举例 张 正 北京大学人民医院 2 主要内容： 主要技术方法及实验原理简介 以PCR、荧光实时定量PCR、NASBA为例 分子生物学检测的临床应用 分子诊断技术在病原学研究的应用进展 乙型肝炎病毒 丙型肝炎病毒 HIV 结核分枝杆菌 3 主要技术方法及实验原理简介 4 分子生物学诊断技术方法简介 1、主体技术 具体方法举例 循环扩增 PCR （聚合酶链反应） Real-time PCR, RT-PCR，巢式PCR，复合PCR PCR-ELISA，微孔板杂交，荧光探针标记法 LCR（连接酶链反应） 恒温 NASBA（依赖核酸序列的扩增，主要用于RNA） SDA（链置换扩增术） CPT（环状探针技术 ） bDNA（枝链核酸信号放大系统 ） 杂交捕获 （如：检测HPV-DNA的试剂盒） 5 分子诊断技术方法简介 2、多标靶同时检测 多重PCR 毛细管电泳 以测序分析为基础的检测技术 6 分子诊断技术方法简介 3、核酸杂交 DNA荧光原位杂交（FISH） 将标记的探针直接原位杂交到染色体或DNA纤维切片上，再用与荧光素分子偶联的单克隆抗体与探针分子特异性结合来检测DNA序列在染色体或DNA纤维上的定位。 线性探针分析法（LiPA） 杂交保护分析法（HPA） 4、基因芯片 5、质谱 利用色、质谱结合PCR技术 7 实验原理简