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微波技术在病理内窥镜标本中的应用
微波技术在病理内窥镜标本中的应用
现代 医学中,内窥镜技术已经被广泛普及。通过内窥镜技术对活组织进行取材做病理检查,成为广大医生做出正确诊断的重要参照,而病理内窥镜标本制片技术正是诊断的重要基础。
病理内窥镜标本一般包括胃镜、肠镜标本,喉镜、气管镜标本及膀胱镜标本。这类活检组织标本较小,使用常规石蜡制片技术,需要3~4天完成制片,在病人急需手术或 治疗 时,常因等待病理报告时间过长而耽误临床诊治工作。为此,我们将微波技术应用于内窥镜标本的制片中,只需1~2小时就完成制片,极大提高了工作效率,且制片质量近似于常规石蜡制片技术,完全符合病理诊断的要求。
1材料与方法
1.1材料选取内窥镜活检标本100例,其中胃镜标本40例,肠镜标本40例,喉镜标本20例。要求组织块小米粒大小,便于固定脱水。
1.2仪器设备三星STG88型微波炉一台。输出功率800W,分六级调节(800W、600W、450W、300W、180W、100W)。
1.3所用药液固定液:95%乙醇,无水乙醇。透明液:按质量比3:1配制的硬脂酸-石蜡液态混合物。Harris苏木精染液。
1.4微波制片将组织放入盛有5ml95%乙醇的青霉素小瓶内,用两层纱布及布绳将瓶口封好,用450W功率微波辐射30秒,至乙醇沸腾。取出小瓶,将剩余液体倒掉,换成5ml无水乙醇,用450W功率微波辐射30秒。倒去无水乙醇剩余液体,用硬脂酸-石蜡液态混合物透明,用450W功率微波辐射4~5分钟。用熔点为56~58的液态纯石蜡浸蜡,450W微波辐射5分钟。组织包埋、切片:包埋时尽量用最小的模具,把所有组织包在一个平面上,切片时待多个组织充分暴露时再切,争取选择多个切面,切片厚4~5μm。用微波烤片:450W微波辐射3分钟。
1.5微波HE染色切片常规方法脱蜡、脱苯、水洗,经微波烤片后,脱蜡时间减少至5分钟,脱苯时间也相应减少,水洗时间正常。吸Harris苏木精染液3~4滴滴于切片上,完全覆盖组织,用600W微波辐射30秒,水洗。1%盐酸酒精分化1~3秒,碳酸锂饱和溶液蓝化至切片泛蓝后水洗1分钟。伊红染色,梯度酒精脱色,中性树胶封片,镜下观察。
2讨论
微波,通常称为“超高频电磁波”,是一种具有能量的电磁波,它具有波长短、频率高的特点,可使物体内部的极性分子以每秒24亿次的速度运动,而在该运动中产生的瞬间热,却能使组织的抗原性保持不变。将微波辐射技术应用于病理内窥镜标本的快速制片中,其基本原理是组织与固定液、切片与染色液,在高频电磁场中,各种分子剧烈振动、相互摩擦、碰撞,极大地加速了固定、脱水和染色的速度,而组织结构及细胞形态保持完整。其用于透明的硬脂酸-石蜡混合液是一种比较温和的透明剂,能有效缓解因快速加温而造成的标本变硬皱缩的副作用。
在制片过程中使用微波,试剂与组织块中的液体交换加快,而染色液更快的进入了组织细胞间隙内,从而缩短了制片时间。光镜下观察,组织层次结构清楚,细胞形态完整,组织细胞染色艳丽醒目,红蓝适度,透明洁净,胞浆胞核对比清晰,完全符合阅片的需要。
在操作中应注意以下几点:加温时用烧杯盛250ml清水放于微波转盘上,用于调节炉内温度,以免高温破坏组织或发生危险。使用微波时,必须将盛放固定液的小瓶封好,以免固定液沸腾时将组织溅出。石蜡可在60恒温箱中事先备好待用,以缩短操作时间。
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